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PNAS:首个有效抵抗PM2.5伤害的简单办法
由多国科学家合△作一项新研究表明:维生素B族可以在减少空气污染对表观基因组的影响中起至关重要的作用,这篇研究文章进一步展示了空气污染对健康的表观遗传影响。这是第一个为防止或减少空气污染...
2017-03-15
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682
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[前沿]
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质粒DNA的提取和制备
质粒(plasmid)是一种染色体外、具有双链闭环结ξ 构的DNA分子。质粒具有自主复制能力,能使子代细胞保持它们恒定的拷贝数,可表达它携带的遗传信息。目前,质粒已广泛地用作基因工程中目的基因的运...
2017-03-14
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[维修]
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琼脂糖凝胶电泳检测DNA的◣方法和技术
[目的要求]通过本实验学习琼脂糖凝胶电泳检测DNA的方法和技术[实验原理]琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定和纯化DNA片段的常用方法。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应,DNA分子在高于...
2017-03-10
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1897
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[维修]
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DNA探针的标记基本原理及∴解决方案
【基本原理】核酸(DNA或RNA)分子探针是指能与互补核酸序列退火杂交,并可被特殊的方法探知的已知序列核酸片段。根据核酸探针标记物的性质及探针的检测方法不同,核酸探针可分为:放射性标记探针...
2017-03-07
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1924
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[方案]
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DNA体↑外连接的基本原理及方案
【基本原理】利用DNA连接酶把目的DNA片段和载体DNA连接在一起,成为一个新的重组分子。目的DNA片段被限制酶消化后其末端只可能有3种形式:(1)带有相同的粘性末端:用同一种酶或同尾酶处理可得这...
2017-03-03
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1161
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[方案]
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Southern blot(印迹)操作步骤
1.琼脂糖电泳(1)取一定※量的待测DNA样品,用适当的限制性内切酶酶切。DNA的量根据样品的种类及实▃验目的的不同而异,对于克隆片段的限制性内切酶图谱分析,取0.1-0.5g即可;而对于鉴定基因组DNA中的...
2017-03-02
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[维修]
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2017年,医用耗材、试剂招标10大趋势
在风风火火的药品招标暂告一个段落后,高值耗材招标又迎来新一轮的高潮,如今多个省份已经进行了一轮或多轮的省级集采,在这■过程中,又出现了以下十大发展趋势。一、省级联采被强化有些人认为耗...
2017-03-02
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[分析]
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Southern blot(印迹)技术的基本原理及方案
【基本原理】Southernblot是将电泳分离的DNA片段转移到一定的固相支持物上的过程。DNA分子用限制性内切酶酶切后,经琼脂糖凝胶电泳将所得〗的DNA片段按分子量大小分离,然后将含DNA片段的琼脂糖凝...
2017-03-01
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1580
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[方案]
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感受态细菌的制备(化学法)
【基本原理】重组DNA分子需导入合适的宿主细胞(真核或原核细胞)才能进行复制,增殖和表达。用于分子『克隆技术中的受体细胞为大肠杆菌K-12的衍生菌(DH5等)。细菌处于易于吸收外源DNA的状态叫感受态...
2017-02-27
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716
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[方案]
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琼脂糖凝胶电泳
【基本原理】琼脂糖凝胶电泳是分离、纯化、鉴定DNA片段的常用方法,具有简便、快速的优点。DNA琼脂糖凝胶电泳的原理与蛋白质的电泳原理基◎本相同,DNA分子在高于其等电点的溶液中带负电荷,在电场...
2017-02-23
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672
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[方案]
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DNA 与RNA 含量测定
【基本原理】核酸分子中含有碱基使核酸在260nm下有最大吸收。紫外吸收是嘌呤环和嘧啶环的共轭双键系统所具有的性质,含有嘌︾呤和嘧啶的物质,不论是核苷、核苷酸或核酸都有吸收紫外光的特性。蛋白...
2017-02-22
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771
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[方案]
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人外〗周血白细胞DNA的制备
【基本原理】从全血中制备白细胞DNA,可用水直接破裂血中红细胞和白细胞的细胞膜及核膜,释出血红蛋白、细胞核;再用KI裂解细胞核并溶解DNA;最后用酚/氯仿除去▲蛋白质,加无水乙醇使DNA沉淀,经A2...
2017-02-21
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679
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[维修]
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蛋白质印迹免疫分析操作步骤
(一)转移印迹1.转移前◣准备:将滤纸,硝酸纤维素膜(NC)剪成与胶同样大小,NC膜浸入蒸馏水中10-20min后浸入转█移buffer中平衡30min。2.凝胶平衡:将电泳后的SDS-PAGE胶板↑置于转移buffer中平衡30-60...
2017-02-10
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914
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[维修]
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蛋白质印迹免疫分析(Western Blot Anglysis)
【基本原理】蛋白质印迹免疫分析的过程包括蛋白质经凝胶电泳分离后,在电场作用下将凝胶上的蛋白质条带转移到硝酸纤维素膜上,经封闭后再用抗待检蛋白质的抗体作为探针ㄨ与之结合,经洗涤后,再将...
2017-02-09
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598
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[方案]
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SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)
【基本原理】一个混合蛋白质样品经过聚丙烯酰胺凝胶电泳以后,各组分由于电泳迁移率不同而被分离。这种差异就蛋白质分子本身而言主要与分子量以及所带净电荷和形状有关。当电泳体系中含有一定浓...
2017-02-07
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1040
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[方案]
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蛋白质比色定量法
【基本原理】游离状态的考马斯亮蓝G250在酸性溶液中呈红褐色,与蛋白质结合后呈蓝色,蛋白质含量与颜色的深浅成正比,经595nm测定,可作出蛋白质含量与吸光度值的标准曲线,并求出未知样品的蛋白...
2017-02-06
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567
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[维修]
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血清γ-球蛋白的◆提取与纯化
【基本原理】在蛋白质溶液中加入中性盐至一定浓度时,蛋白质会沉淀析∑ 出,这种作用称为盐析,其机制与下列因素有关:蛋白质分子表面水化层被破坏;蛋白质分子所带电荷被中和。盐析沉淀的蛋白质,其...
2017-02-04
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1277
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[原理]
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分配层析原¤理 Distribution Chromatography
分配层析是利用混合物中各组分在两相中分配系数不同而达到分离目的@的层析技术,相当于一种连续性的溶剂抽提方法。在分配层析中,固定相是极性溶剂(例如水、稀硫酸、甲醇等)。此类溶剂能和多孔的...
2016-12-13
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13715
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[原理]
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生Ψ 物大分子制备原理
一、透析和超♀滤(DialysisandUltrafiltration)1、透析是利用蛋白质等生物大分子不能透过半透膜而进行纯化的一种方法。脱盐透析是应用最广泛的一种透析方法。将含盐的生物大分子溶液装入透析袋内,...
2016-12-01
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754
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[原理]
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以蛋白质为例的分离纯化实验
盐析(Saltingout)盐析方法是蛋白质和酶提纯工作中应用最早,至ζ 今仍广泛应用的方法。其原理是蛋白质在高浓度的盐溶液中,随着盐浓度的逐♀渐增加,蛋白质表面的电荷被中和,水化膜被破坏,蛋白质分...
2016-11-30
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551
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生物大分子的基本制备技术
生物大分子的基本制备技术生物大分子的制备过程包括选材、细胞破碎和细胞器分离、生物大分子提取纯化、以及样品浓缩干燥和储存等。生物大分子的制备是一项十分细致的工作,既要设法得到它们的纯...
2016-11-29
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核酸的鉴定、保存与应用
(一)核酸的鉴定1.浓度鉴定核酸浓度的定量鉴定可通过紫外分∮光光度法与荧光光度法进行。(1)紫外分光光度法:紫外分光光度法是基于核酸分子成分中的碱基均具有一定的紫外线吸收特性,最大吸收波长在...
2016-11-28
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1083
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[维修]
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核酸分离与纯化的技术路线设计
(一)核酸的释放正常情况下,无论是DNA还是RNA均位于细胞内,因此核酸分离与纯化的第一步就是破碎细胞、释放核酸。细胞的破碎方法非常多,包括机械法与非机械法两大类。机械法又可分为液体剪切法...
2016-11-25
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1025
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[维修]
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核酸分离与纯化的设计与原则
细胞内的核酸包括DNA与RNA两种分子,均与蛋白质结合成核蛋白(nucleoprotein)。DNA与蛋白质结▆合成脱氧核糖核蛋白(deoxyribonucleoprotein,DNP),RNA与蛋白质结合成核糖核蛋白(ribonucleoprotein...
2016-11-24
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506
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[原理]
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华中科大携手无限极成╱立联合实验室
10月20日,无限极携手华中科技大学及国家纳米药物工程技术研究中心,在湖北省武汉市成立华中科技大学无限极现代制剂技术联合实验室(下简称联合实验室)。双方强强联合,优势互补,致力于共』同打造...
2016-11-21
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[地方]
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亚硝酸盐的简介和基本用途
亚硝酸盐,类无机化合物的总称。主要指亚硝酸钠,亚硝酸钠为白色至淡黄色粉末或颗粒状,味微咸,易溶于水。硝酸盐和亚硝酸盐广泛存在于人类环境中,是自然界@ 中普遍的含氮化合物。人体内硝酸盐ω 在...
2016-11-16
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[应用]
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实时∏荧光定量PCR技术
实时荧光定量PCR技术(Real-timeqPCR)是一种在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过特定数学原理对未知模板进行定量分◆枂的方法。因其定量准确、特异性强、操...
2016-11-11
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951
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[方案]
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ES细胞〓的复苏方法
1.提前制备好相应数量的Feeder;2.准备37-39℃的热水,从液氮罐中取出所需冻存管(冻存细胞),迅速投入热水中,迅速剧烈摇动直至冻存液全部融化;上海创赛科技提供细胞冻存管,FreezingTubes,商品...
2016-11-08
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[维修]
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ES细胞的传代操作方法
步骤:1.前一天下午做好所需数≡量的Feeder细胞板;2.提前半小时左右将培养基从4℃冰箱取出,放于室温(或者放于37℃温箱内);3.将ES细胞培养皿、Feeder细胞培养皿从培养箱内取〓出(相差显微镜下作常规...
2016-11-04
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1244
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[维修]
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饲养层细胞(Feeder)的制备
饲养层细胞(Feeder)的制备注:含10ug/ml丝裂霉素C的DMEM血清培养基(FBS占10%)(实验室所用MMC为10mg/mL,Calbiochem)1.弃去细胞培养皿▲中的培养液,加入适量含10ug/ml丝裂霉素C的培养基(DMEM+10%F...
2016-11-03
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DMEM培养基配置方法
一、配制DMEM血清培养基1.提前一天将分装好的FBS从20℃冰箱取出,放于4℃冰箱化冻;2.在细胞间中将FBS以及其它需要添加的成分(如,丙酮酸钠、抗生素等),按照比例加入DMEM培养基中,作好标签;...
2016-11-01
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利用Map viewer查找基因序列、mRNA序列
利用Mapviewer查找基因序列、mRNA序列、启动子(Promoter)NCBI(NationalCenterforBiotechnologyInformation)是指美国国立生物↑技术信息中心。理解自然无声但精妙的关于生命细胞的语言是现代分子生...
2016-10-27
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实验动物免疫方案
用免疫学的基本理论和技术来诊断、预防和治疗疾病,并在此々基础上开展的采用人工方法向机体输入由他人或动物产生的免疫效应物,如免疫血清、淋巴因子等,使机体立即获得免疫力。其特点是产生作用...
2016-10-24
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[方案]
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PD-1/PD-L1抑制剂在肿瘤治疗中应用
肿瘤ξ 的免疫治疗是以激发和增强机体的免疫功能,以达到控制和杀灭肿瘤细胞的目的。肿瘤免卐疫治疗是当前肿瘤治疗领域中最具前景的研究方向之一。在过去不久的诺贝尔医学奖热门获奖名单中,肿瘤治疗...
2016-10-21
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[应用]
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免疫共【沉淀方法进行蛋白质检测的优缺点
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相◆互作用的经典方法。是确定两种蛋白ㄨ质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。当细胞在非变性条件下...
2016-10-20
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体外诊断试剂临床研究的基本要点
医学上正确的诊︼断是采取有效防治措施的基础,各种诊断试验是构成正确诊断的必备条件。随着医学科学的⌒发展,对疾病认识的不断深化和大量新技术、新设备的应用,新的诊断试验必将不断代替旧的诊断...
2016-10-19
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[应用]
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撰写体外诊断试剂制造检定规程的有关问题
撰写体外诊断试剂制造检定规程的有关问题制造检定规程的具体内容来源于诊断试√剂研究工作的结论,即根据研究报告中相关的结论,撰写规程中有关原料和辅料方面、制造程序方面以及检定项目和指标方...
2016-10-18
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开发用于筛检试验的体外诊断试剂的注意问题
按▃临床使用目的,可以将诊断试剂分为用于筛检试验(Screeningtest)和用于临床诊断(Diagnostictest)两类。筛检试验是指应用简便快速的实验或其它检测方法,从大量表面健康的人群中查出某种疾病可疑...
2016-10-17
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成年猪胰岛分离纯化方法的优化
成年猪胰岛分离纯化方法的优化实验试剂胶原酶V,512kut/mg,DNA酶,胎牛血清,RPMI1640培养液,Dextran,Hanks平衡盐溶液。以上实验产品上海创赛科技均可现∞货供应,欢迎订购咨询。实验设备离心机...
2016-10-14
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酸性磷酸酶的显示方法实验步骤
实验试剂1.10%中性福尔马林(pH6.8~7.1)甲醛10ml蒸馏水90ml醋酸钠2g2.酸性磷酸酶作用液蒸馏水90ml0.2mol/L醋酸缓冲液(pH4.6)12ml5%硝酸铅2ml3.2%甘油磷酸钠4ml先将蒸馏水和醋酸缓冲液混合,随后...
2016-10-11
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