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                教育装ω 备采购网
                第六届图书馆论坛580*60

                人外周血白细胞DNA的制备

                教育装备采购网 2017-02-21 10:24 围观677次

                  【基本原理】

                  从全血中制备白细胞DNA,可用水直接破裂血中红细胞和白细胞的细胞膜及核膜,释出血红蛋白、细胞核;再用KI 裂解细胞核并溶解DNA;最后用酚/氯仿除去蛋白质,加无水乙醇使DNA沉淀,经A260/A280检测DNA含量,再经琼脂糖电泳鉴定。

                  【器材】

                  1.离心机

                  2.紫外分光光度计

                  【试剂】

                  1.5mmol/L KI:8.3g KI加H2O到10ml

                  2.0.9% NaCl

                  3. 氯仿/异戊醇(24:1)

                  【操作步骤】

                  1.取200μl抗凝血,加入1ml 水。

                  2.8000rpm离心5min,弃上清。

                  3.沉淀中加入40μl 5mol /L KI,旋涡振荡30Sec。

                  4.加入200μl 0.9% NaCl,然后再加入300μl氯仿/异戊醇,振荡30Sec。

                  5.10 000rpm离心5min。

                  6.小心吸取上清液,加︾入冷无水乙醇1ml。

                  7.10 000rpm离心5min,弃无水乙∮醇。

                  8.DNA 样品自然干燥。

                  9.加适量的H2O或TE溶解DNA。

                  10.核酸定量测定和电泳鉴定。

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                点击进入上海创赛科技有限公司展台查看更多 来源:教育装备采购网 作者:上海创赛科技有限公司 责任编辑:黄磊 我要投稿
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