【基本原理】
琼脂糖凝胶电泳是分离、纯化、鉴定DNA片段的常用方法，具有简便、快速的优点。DNA琼脂糖凝胶电泳的原理与蛋白质的电泳原理基本相同，DNA分子在高于其等电点的溶液中带负电荷，在电场中向正极移动。DNA 分子在电场中通过介质而泳动，除电荷效应外，凝胶介质还有分子筛效应，与分子大小及构象有关。对于线性DNA 分子，其电场中的迁移率与其分╳子量的对数值成反比。在凝胶中加入少量溴化乙锭，其分子可插ζ入DNA的碱基之间，因此可在紫外灯下直接观察到DNA片段在凝胶上的位置，并可在紫外灯下或经凝胶成像系统观察或拍照※。
【器材】
1.水平电泳槽
2.电泳仪
3.紫外灯或凝胶成像仪
【试剂】
1.1%琼脂糖
2.电泳缓冲液(1×TAE)
3.10mg/ml EB
4.电泳样品上样缓冲液：0.25%溴酚蓝, 0.25%二甲苯腈FF, 40%(W/V)蔗糖水溶液4℃保存。
【操作步骤】
1.称0.2g琼脂糖，加20ml电泳缓冲液(1×TAE)加热熔化。
2.胶液冷至60℃时，加EB 20μl，小心混匀，缓慢倒入制胶模■具中，在胶一端』插上梳子。
3.待胶凝固后，拨出梳子，将模具置于电泳槽中，加入1×TAE，让液面高于胶面1mm。
4.在DNA样品中加入1:5的上样①缓冲液，上样。
5.接通电源，1-5V/cm电压，开始电泳。
6.据〓指示剂迁移位置，判断是否终止电泳。切断电源后，取出凝胶，紫外灯下或经凝胶成像系统观察或拍照。
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