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                猪酶联免↙疫分析elisa试剂盒具体操作步骤

                教育装备采购网 2013-05-30 17:39 围观1869次

                  猪酶联ω 免疫分析elisa试剂盒操作步骤:

                  1. 标准品的稀释与〒加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第→一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然⌒后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和卐第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液Ψ 50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混□匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀︻后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别↓为36 mIU/L,24 mIU/L ,12 mIU/L,6 mIU/L,3mIU/L)。

                  2. 加样:分▲别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测々样品孔〇。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品∞稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动№混匀。

                  3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

                  4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后▃备用。

                  5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加☉满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

                  6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

                  7. 温育:操作同3。

                  8. 洗涤:操作同5。

                  9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入▲显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

                  10. 终止:每孔加终止液Ψ50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

                  11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟』以内进行。

                  猪酶联◆免疫分析elisa试剂盒

                  注意事项:

                  1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用〖,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

                  2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴》中加温助溶,洗涤时不影响结果▓。

                  3. 各步加样均应使∩用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

                  4. 请每次测定的同时做标准∮曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以☆总稀释倍数(×n×5)。

                  5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

                  6. 底物请避光保存。

                  7. 严格按照说明书的操作进ζ行,试验结果判〓定必须以酶标仪读数为准.

                  8. 所有样品,洗涤液和ζ各种废弃物都应按传染物处理。

                  9. 本试剂不同批号组分不得混用。

                  10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

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