摘要：本研究利用定向进化的方法对疏绵状嗜热丝孢菌（Thermomyces?lanuginosus）脂肪酶LGY进行分子改造。采用易错PCR方法，建立了≡含有14755个转化子的突变体库。以高活力为筛选压力，通过三丁酸甘油酯平板透明圈法、G418平板、小量发酵筛选和大量发酵测酶活，最后筛选出一株正向突变菌株，对此工程菌进行发酵，通过硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose阴离子交换柱层析等步骤纯化了突变蛋白并测定酶活，结果其酶活是野生菌株所产酶活力的2.3倍。对此突变基因进行♂测得的序列，并与野生基因比较，有3个碱基位点发生变化，其中两个位点引起氨基酸的变化，它们是G96V，A192V。将这株定点突变工程菌株最终命名为GS-LGYM。
- 专利类型发明专利
- 申请人山东农业大学;
- 发明人李多川;李安娜;韩双;
- 地址271018 山东↘省泰安市岱宗大街61号
- 申请号CN201310204916.4
- 申请时间2013年05月28日
- 申请公布号CN103243038A
- 申请公布时间2013年08月14日
- 分类号C12N1/19(2006.01)I;C12R1/84(2006.01)N;C12R1/645(2006.01)N;
