摘要:本发明提供一种制备纯度好、活性高且能够←稳定存在的AHAS的方法。该方法包括以下步骤:根据大肠杆菌AHAS催↓化亚基的基因序列设计上下游引物,设计的上游引物带有Xho?I酶切位点,下游引物带有BamHⅠ酶切位点,以大肠杆菌BL21菌株基因组DNA为模板,通过PCR扩增技术得到目的片断ahas;将目的片【断ahas连接到表达载体PGEX-AT-1上,得到重组※质粒PGEX-4T-1-ahas,并在原核表达系统中实现诱导表达;用谷胱︽甘肽巯基转移酶(GST)修饰的琼脂糖凝胶树脂对所表达的酶进行纯化,从而获得活性良好的乙酰乳酸∩合酶。
- 专利类型发明专利
- 申请人西北大学;
- 发明人高文运;李恒;刘楠;王文婷;
- 地址710069 陕西省西安市太白北路229号
- 申请号CN201310743685.4
- 申请时间2013年12月27日
- 申请公布▅号CN103710328A
- 申请公布时间2014年04月09日
- 分类号C12N9/88(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N;