一、原理 ：
在浓氯化钠(1―2mol/L)溶液中，脱氧核糖核蛋白的溶解度很大，核糖核蛋白的溶解度很小，在稀氯化钠(0.14 mol/L)溶液中，脱氧核糖核蛋白的溶解度很小，核糖核蛋白的溶解度很大。因此，可利用不同浓度的氯化钠溶液，将脱氧◤核糖核蛋白和核糖核蛋白从样品中分别抽提出来。
将抽提得的核蛋白用SDS(十二烷基硫酸钠)处理，DNA或(RNA)即与蛋白质分开，可用氯仿―异戊醇将蛋白质沉▆淀除去，而DNA则︻溶解于溶液中。向◆溶液中加入适量乙醇，DNA即析出。
为了防止DNA或(RNA)酶解，提取时加入EDTA(乙二胺四乙酸)
二、实验材◎料与仪器 ：
1、小白鼠肝脏
2、匀浆器
3、离心机5000r/min
4、量筒50ml(×1)，25 ml(×1)，10 ml(×1)
5、 吸管5 ml(×2)
6、水浴锅
7、真空干燥器
三、试剂 ：
1.5 mol/L NaCl 溶液：将292.3g NaCl 溶于水，稀释至1000ml。
2.0.14mol/L NaCl―0.15mol/L EDTA―Na 溶液： 溶8.18g NaCL 及37.2g EDTA―Na 于蒸馏水，稀释至1000ml。
3.25% SDS 溶液： 溶25g 十二烷基硫酸钠于100ml 45% 乙醇
4.0.015 mol/L NaCL―0.0015 mol/L 柠檬酸▼三钠溶液： 氯化钠 0.828 g及柠檬酸三钠0.341g 溶于蒸馏▃水，稀释至1000ml。
5.氯仿―异戊醇混合液：氯仿：异戊醇=24：1(V/V)。
6.1.5 mol/L NaCL―0.15 mol/L柠檬酸三钠溶液：氯化钠 82.8 g 及柠檬酸三钠34.1 g溶▲于蒸馏水，稀释至1000ml。
7.3 mol/L乙醇钠―0.001 mol/L EDTA―Na溶液： 称取乙酸钠 408 g，EDTA―Na 0.372g 溶¤于蒸馏水，稀释至1000ml。
8.70%乙醇，80%乙醇，95%乙醇，无水乙醇。
9.二苯胺试剂
10.1 mol/L过氯酸溶液：将10ml过氯酸(70%)用蒸馏水稀释至110ml。
四、操作 ：
1. DNA的分离纯化：
(1)将10头小白鼠迅速杀死，取出肝脏，用0.14mol/LNaCl―0.15mol/l EDTA溶液洗去血浆，剪碎，加入50ml0.14mol/L NaCl―0.15mol/lEDTA溶液，置匀浆器中研磨，待磨成糊々状后，将糊状物█离心10分钟(4000r/min)，弃去上清液№，沉淀用0.14mol/LNaCl―0.15mol/L EDTA溶液洗二、三次，所得沉淀为脱氧核糖核蛋白粗制品。
(2)向上述沉淀物加入0.14mol/LNaCl―0.15mol/L EDTA溶液，使总体积为44ml，然后滴加25% SDS溶液 3ml，边加边搅拌，加毕，置60水浴保温10分钟(不停搅拌)溶液变▼的粘稠并略透明，取出冷至室温。此步操作是使核酸与⌒ 蛋白质分离。
(3)加入5mol/LNaCL10ml，使NaCl 最终浓≡度达到1mol/L，搅拌10分钟，加入月约一倍体积的氯仿―异戊醇混合溶液，振摇20分钟，离心10分钟(4000r/min)。去掉沉淀，上层清液徐徐加入1.5―2倍95%乙醇，DNA沉淀即析出，用玻棒◥慢慢搅动，则DNA丝状物←即缠在玻棒上。
(4)将DNA粗品置于27ml 0.015 mol/L NaCl ―0.0015 mol/L柠檬酸三钠溶液中，再加入3ml1.5 mol/L NaCl―0.15 mol/L柠檬酸三钠溶液，搅匀,加入一倍体积氯仿―异戊醇混合液，振摇十分钟】，离心(4000r/min，10分钟)，倾出上层液体(沉淀弃去)，加入1.5倍体积95%乙醇，DNA即沉淀析出。离心，弃去上清液，沉淀(粗DNA)按本操作步骤重复处理一次。
(5)将上步所得沉淀于27ml 0.015 mol/L NaCl―0.0015 mol/L柠檬酸三钠溶液中，然后以线状徐徐加入2倍95%乙醇，边加边搅，取出丝状DNA，依次用70%，80%，95%以及无水乙醇∩各洗一次，真空干燥。
2. 鉴定： 用二苯胺法测╳定DNA。
