人抗乙型肝炎病毒核心》抗体(HBcAb)ELISA试剂盒

　　Elisa kit规格：48孔配置/96孔配置

　　标准品稀释液：1.5ml×1瓶

　　酶标试剂：3 ml×1瓶(48)/6 ml×1瓶(96)

　　【人抗乙型ζ肝炎病毒核心抗体(HBcAb)elisa试剂盒】本试剂仅供研究使用

　　计算：

　　以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计∞算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

　　试剂盒组成：

　　封板膜:2片(48)/2片(96)

　　说明书:1份

　　密封袋:1个

　　标准品： 2700ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存

　　酶标包ω　被板: 1×48 1×96 2-8℃保存

　　样品稀释★液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存

　　显色剂A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存

　　显色剂B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存

　　终止液: 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存

　　浓缩洗涤液:(20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2-8℃保存

　　实验原理：

　　本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人∏抗乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)水平。用纯化的人抗乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)抗体包被微孔板，制』成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入抗乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)，再与HRP标记的抗乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后〓加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的抗※乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸♂光度(OD值)，通过标准曲线计算样品中人抗乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)浓度。

　　目的：本试剂盒用≡于测定让人血清，血浆及相关液体样本中抗乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)的含量。

　　服务承诺：

　　供货期：款到发货。

　　工作时间内免费的技术咨询和指导。请来电咨询

　　为客户提供来样检测服务，最大限度实验结果的有效性(免费代测)。

　　保存条件及有∏效期：

　　试剂盒保Ψ存：2-8℃| 有效期：6个月

　　【人抗乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)elisa试剂盒】样本处理及要求：

　　1. 血清：室温血▲液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收☉集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

　　2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝△剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清「〓，保存过程中如有◤沉淀形成，应该再次离心▂。

　　3. 尿液：用无菌【管收集，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

　　4. 细胞培养上清：检测分△泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时◥，用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

　　5. 组织标本：切割标本后№，称取重量。加入一定量的▓PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻ξ　保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4)，用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备【用。

　　6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文╲献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将◆标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.

　　7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧◇化物酶的(HRP)活性。

　　操作步骤

　　1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上∞设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在↑第一、第二孔中加标准ω　品稀释液50μl，混匀;然后从第一孔、第二☆孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分⌒别加标准品稀释液50μl，混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加卐标准品稀释液50ul，混匀;混匀◆后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第※九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都※为50μl，浓度分别为1800ng/L，1200ng/L ，600ng/L，300ng/L， 150ng/L)。

　　2. 加样：分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶▃标试剂，其余︾各步操作相同)、待测样品孔ω　。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔⊙底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混卐匀。

　　3. 温育：用封板膜封板后※置37℃温育30分钟。

　　4. 配液：将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。

　　5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

　　6. 加酶：每孔加入酶标①试剂50μl，空白孔∑　除外。

　　7. 温育：操作同3。

　　8. 洗涤：操作同5。

　　9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入↙显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

　　10. 终止：每孔加终止◤液50μl，终止反应(此时蓝色立转黄色)。

　　11. 测定：以空白空【调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

　　【人抗乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)elisa试剂盒】注意事项：

　　1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方△可使用，酶标包」被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。