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LBA4404农杆菌感受态细★胞

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品　　牌：国产

产品型号：CC2901 (20*100ul)

所在地区：上海

详细说明

产品介绍：
采用化学试剂制备的LBA4404农杆菌感受态▂细胞，适用于玉米和烟草等植物的转基因操作。具有链霉素和利福平抗性，经植物双元pCAMBIA2300M质粒检测，转』化效率可达103CFU/ug，-80°C保存几个月转化效率不会发生改变。

转化前准备：
1.冰水浴和37℃水浴。
2.液氮或干冰ω/乙醇混合物。
3.将抗性平板在28℃培养箱中★平衡至少15分钟。

转化方法（采用冻融方法）：
1.取-80℃保存的LBA4404农杆菌感受态→细胞⊙于冰水浴中融化。
2.无菌条件下，向刚刚化冻的感受态细〇胞悬液中加入1ug需要转化的质粒DNA细胞中，轻轻混匀，冰水浴中静置10分钟。
3.将离心管至于︾液氮中速冻5分钟。（注：也可以用干冰和无水乙醇混合物代替液氮）
4.然后快速将离心管置于37℃水浴中保持 5分钟，不要晃动水面。
5.将离心管放回冰水浴中，再保持 5分钟。
6.无菌条件下加入800ul无抗生素的2×YT或LB液体培养△基。于28℃振荡培养2-3小时，目的是使菌体复苏并表达抗生素抗性。
7.5000rpm离心 1分钟收菌，留100ul左右上清，轻轻吹打重悬菌体，加到相应〖抗生素的LB固体培养←基平板上，用无菌的细菌涂布器或玻璃珠将细胞均◣匀涂开。等平板中的液体完全吸收后，倒置平板，28℃培养48-72小时。

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