●产品编号及规格：
RTD6110 10T（50μl） 350元
● 储存条件：
-20℃保存，开封后有效期12个月
● 产品简介：
彩虹预染超低分子量蛋白质Marker可以直接观察蛋白电泳及清晰判断Western Blotting的转膜效果。本产品包含3种多肽和3种低分子量蛋白质组成，分子量范围为1.2kD-45kD，分子量大小为 1.2kD，4.6kD，6.5kD，16kD，27kD，45kD (注：蛋白大小已在18%Tricine-SDS-PAGE中用非预染蛋白Marker标定过。参见ξ 注意事项7)。
● 使用说明：
1. 超低分子量多肽的蛋白电泳较常规的蛋白电泳更为复杂，请仔细参阅说明书后再进行操作。
2. 第一次收到产品后，室温彻底融化混匀，离心快甩将溶液收集到管底，根据需要适量分装，-20℃贮存，每次使用时取一管使用。
3. 本产品为即用型产品，使用前取一管Marker样品室温彻底融化后可以直接上样，不要加热。一般说来，0.75mm×5mm（厚度×宽度）的加样孔上样5 μl，其他规格梳子请适当调整上样量。
4. 制胶：先配制分离胶，聚合后再配制浓缩胶。电泳时，80v跑30-60分钟左右，待指示前沿到达分离胶上沿时，把电压调至130-150v，至所有条带分离清楚后即可停止电泳。整个电泳过程大约需要3-4个小时。
5. 如果关心较小的多肽（小于5KD），电泳之后可将胶置于固定液（配方6）中固定30分钟，再进行染色，能得到较好的蛋白条带；如果不固定直接染色，小蛋白会不清楚。如果使用配方7进行染色时效果不好或考虑其毒性，请选择本公司的考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液（目录号：RTD6201），该产品具有染色快，无毒，灵敏性高等特点，在小肽的染色中有更大的优势，是常规染色液的理想替代品。
6 染色：如果使用配方7进行染色时效果不好或考虑其毒性，请选择本公司的考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液（目录号：RTD6201），该产品具有染色快，无毒，灵敏性高等特点，是常规染色液的理想替代品。
<!--[if !vml]-->
<!--[endif]--><!--[if !mso]-->
|
|
1. 40%PAA（29:1）（配制浓缩胶） 丙稀酰胺 38.67 g 甲叉双丙稀◆酰胺 1.33 g 用ddH2O溶解后定容至100 ml，过滤后使用。 贮存：4℃ |
2. 40% PAA（19:1） （配制分离胶） 丙稀酰胺 38 g 甲叉双丙稀酰胺 2 g 用ddH2O溶解后定容至100 ml，过滤后使用。 贮存：4℃ |
3. 凝胶缓冲液（配制凝胶用） [3M Tris; 0.3% SDS; pH8.45] Tris碱 182g ddH2O 300ml 1.5 g SDS或15ml 10％ SDS 用HCl调pH值至8.45 用ddH2O定容至500ml 贮存：4℃ |
|
4. 10×阳极缓冲¤液（下槽缓冲液） [1M Tris pH8.9] Tris碱 121.1g ddH2O 400ml 用HCl调pH值至8.9 用ddH2O定容至500ml 贮存：室温 注：使用前稀释成1×阳极缓冲液使用。 |
5. 10×阴极缓冲液（上槽缓冲液） [1M Tris; 1M Tricine ;1% SDS; pH 8.25] Tris碱 121.14 g Tricine 179.2 g SDS 10g 用ddH2O溶解， 用HCl调节pH至8.25，定容至1000ml。 贮存：室温 注：使用前稀释成1×阴极缓冲液使用 |
6. 固定液 5％ 戊二醛溶液 注：此溶液现用现配。 |
|
7. 染色液 冰醋酸 100ml 考马斯亮蓝G-250 0.25g 水 900ml |
8. 脱色液 冰醋酸 100ml 水 900ml
|
9. 2×Tricine蛋白样品上样缓冲液（10ml） 1ml 1M Tris-Cl pH6.8 2.4ml 甘油 0.8g SDS 0.31g DTT（或者400μl β-巯基乙醇） 2mg 考马斯亮蓝G-250 用灭菌ddH2O定容至10ml 混匀分装-20℃贮存备用 |
超低分子量蛋白Marker凝胶的配制方法：
（一块0.75mm mini胶用量）
|
|
分离胶 |
浓缩胶 |
|
|
18％T, 5%C /6.0 ml |
5％T, 3.3%C/4 ml |
|
40% PAA（19:1） |
2.7 ml |
/ |
|
40% PAA (29:1) |
/ |
0.5 ml |
|
凝胶缓冲液 |
1.5 ml |
1 ml |
|
乙二醇 |
1.8 ml |
/ |
|
ddH2O |
/ |
2.5 ml |
|
10％APS |
45 μl |
30 μl |
|
TEMED |
9 μl |
6 μl |
