包被用抗〓原
天然抗原、重组抗原和合成多肽抗原三大类。合成多肽抗原是抗原决定簇的氨基酸序列人工合成的多肽片段。一般只含有一个抗原决定簇,纯度高,特异性也高,但由于分子量太小,往往难于直接吸附于固相上。借助于偶联物与固相载体的吸附,间接地结合到固相载体表面。
包被用抗体
IgG对聚苯乙烯有强吸附力,其联结发生在Fc段上,抗体结合点暴露于外。取材于抗血清或含单克隆↑抗体的培养液.须除去杂抗体后才能用于ELISA,以保证试验的特异性。
腹水中单抗的浓度较高,特异性亦较强,因此不需要作吸收层析处理,直接包被。在某些∩情况下,用多种单抗混合包被,可取得更好的效果。
加入包被液后,在4-8℃冰箱中放置,37℃中保温2小时。包被浓度随♀载体和包被物的性质可有很大的变化,每批材料需通过实验与酶结合物的浓度协☆调选定。一般蛋白质的包被浓度为10ng/ml-20ug/ml。