[本期主题]:十月新颁ELISA试剂盒说明书内容公布
[产品规格]:96T 48T
[应用范围]:科研用检测试剂
[保存温度]:短期4℃/长期-20℃保存(用干冰或者冰袋低温运输)。
[有 效 期]:6个月
[销售优势]:量大从优、质量保证、如果质量问ㄨ题包退换、含税含运∏费。
[供 应 商]:上海恒远生物科技有∑ 限公司
·影响ELISA检测实验因素
标本的影响:溶血标本及混有红细胞的血清采用ELISA法检测易产生假阳性。可能是溶血血清中含有过氧化酶物质(红细胞或血红★蛋白中的亚铁血红素),在洗涤过程中往往难以完全洗脱,它可使H2O2释放出原生态氧(O),从而催化底物四甲基联苯︽胺生成可溶性的有色物质,即显蓝色,产生假阳性。所以严重溶血标本禁用。
标本受细菌污染:因菌体中可能含有内源性辣根过氧化物酶,因此,被细菌污染的〓标本同溶血标本一样,亦可产生非特〖异性显色而干扰测定结果。
·使用方法
1. 使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。
2. 取所需用量包被微孔板条,设空白、阴性及阳性对照各☉2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。
3. 阴性、阳性对照孔分别加阴性、阳性对◣照血清100μl;样品孔样本1:100稀释后加100μl;空白对照孔不加。
4. 混匀,置37℃温浴30分钟。
5. 扣去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置60秒后弃去,重复洗涤5次,拍干。
6. 每孔加酶标记物100μl(空白孔除∴外)。
7. 置37℃温浴30分钟。
8. 洗涤,同步骤5。
9. 每孔依次加显色剂A、显色剂B各50μl,混匀,37℃避光反应10分钟。
10.每孔加终止液50μl,混匀,置酶标仪450nm处测各孔A值(建议用双波长450nm、630nm)。
·计算方法
以标准物的浓度〒为横坐标,OD值为纵【坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的∞OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以※稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标「准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式←,计算出样品浓度,再乘以稀释卐倍数,即为样品的实际浓度。
·优化封闭液,不被背景问题困扰!
这一问题是上海恒远生物新版ELISA试剂盒说明书增添内容之一。面对◆背景问题,优化封闭液可能需要时→间,但也是值得的。目前主要有两种类型的封闭液:蛋白和非离子型去污剂。您使用的类型须取决于多个因素,包括微孔板的表面试剂、吸附的抗ω原、您的抗体和检测试剂。好的封闭液应降低非特异性结合,但它不⌒应当与抗原〗、抗体或检测试剂发生相互作▲用。