蛋白质、肽、糖类、核酸、脂质和其他许多天然存在或合成的化合物可成功扮演免疫∴原的角色。肽和非蛋白抗原通常需要与载体蛋白进行偶联后才能有效发挥免疫原的作用。这是由于它们的分¤子量小,需要载体提供II类T受体结合部位。另外可能还需要注射佐剂来确保获得高质量/数量的反应。佐剂是免疫反应的非特异性刺激物。加入佐剂后不卐仅可以降低抗原的使用剂量,而且还能提︻高抗体反应的持久度。
Abcam的杂交瘤细胞培养
【多克隆㊣ 抗体制备】
通过抗原X诱发免疫反应来制备多克隆抗体。每隔几周重复利用相同的抗原来诱发免疫反应,可刺激特异性〇B细胞在血液中分泌出大量抗X的抗体。由于许◥多不同的B细胞都受到抗原X的刺激,因此血液中将包含各种抗X的抗体,它们与X的结合方式略有不同。可直接使用存在高含量特异性抗体的粗制免疫血清,也可通过亲和纯化技术将特异性抗⊙体从血清成分中分▂离出来。
【单克隆抗体制备】
要制备单克隆抗体,则采用相同的免疫方案并提取所有抗体形成细胞。将这些细胞与永生性瘤〖细胞融合形成杂交瘤▲细胞,然后筛选用于制备抗体。产生抗体的杂交瘤细胞均被赋予ㄨ唯一的克隆名,以便于鉴别。通过分离,然后利用组织培养法进行培养或在小鼠体内产生腹水的方式来克隆∑出产生抗体的杂交瘤细胞。不同于多克】隆抗体,单克隆抗体「是具有明确特异性的均质性抗体。可从培养基中获得此类细胞分泌出的抗体。可使用粗制的组织培养物上清液,或利用亲和纯化技术对此上清液进一步提纯。
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杂交瘤细胞的制备方法