抗体的产生
把某一抗原免疫某种动物而得到∑ 单抗或多抗。如果用经免疫过的动物的脾细胞获得杂交瘤细胞,则得到单克隆抗体,如果用动物的血清,则得到多克隆∴抗体。但从理论上说,这些抗体都应针对抗原来自的动物,例如如果用人蛋白抗原免疫小鼠,则这些抗体为鼠抗人。由于一个大蛋白分子表面具有多种抗原决定簇,因此,免疫动物后,这些不同的决定簇分别诱导动物产生不同的抗体,每种抗体的特异性不同。上海创赛科技提供BD抗体550041,PE Mouse Anti-Human CD30,商品编号:BD-550041-20 µl,询价。
单抗是有单个细胞起源的细胞克隆分泌的,所以只针对蛋白抗原的单♂一抗原决定簇,而※多抗是有多个不同克隆的B细胞产生的,是多种细胞的混合物,但其中的每一◥种抗体也只是针对一种决定簇。多抗混合物中的每一抗体与蛋白抗原结合的★能力是不同的,因此用多抗做实验与用单抗可有其优势,那就是能确保抗体与抗原结合从而显示抗原信息。但也有其缺点,那就是交叉反应,往往造成假阳性▽。从理论上说,用人抗原诱导产生的抗体应只能用于人类,但由于↘动物种属之间,特别是相近的动〗物之间,如人与猩猩,大鼠与小鼠存在着同源性ㄨ,导致抗体的交叉反应,即用一种动物抗原诱导产生的抗∑体也可与其它一些动物的抗原反应。
由于单抗只针对单一抗原决定簇,因此,其能导致的交叉反应很少,而多抗是混】合物,导致的交叉反应就多一些。但并不是向你所△认为的那样,多抗可与所有种属动物反应。在选择抗体时,如果你标本来源于←人,当然应选◎用如鼠抗人或兔抗人等。如果抗体来源确实不清,那应该⊙先预实验。选择已知阳性标本,在充分设置阴性对照的前提▲下,用此抗体●染色,看能否显示阳性结果。
抗原的区别
可以引起〗机体产生抗体的分子结构叫做抗原决定簇,也称々为抗原表位。一个抗原可以有许多不同的抗原决定簇,因此,机体也可以产生多种不同的抗体。由单一B细胞克隆产生〒的高度均一、仅识别某一特定抗原表位的々抗体,称为单克隆抗体。而由多个B淋巴细胞克隆产生的,受到多种抗原决定簇刺激并可以@ 与多种抗原表位结合的抗体就是多克隆抗体。
制备☆的区别
经过特定抗原处理过的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞通过细胞融合的方法得到杂交瘤细胞,经HAT培养基筛◣选、ELISA检测效价后就得到阳性克隆株,最后进行细胞培养或将细胞◥注入到动物(一般为balb/c小鼠)腹腔中用腹水培养,收集上清/腹水纯化后就能得到单克隆抗※体。而制备多克隆抗体ㄨ就没有单克隆抗体繁琐,只需将抗原(纯度越高越好)直接注入到动物≡体内进行免疫,经过3~4次免疫,ELISA测其效价合格后,收集血液离心得到↘上清,纯化后即能得到多克隆抗体。因此多抗制备的周期就比单抗制备的短,首次制备价格也比单抗要低。
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