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                教育装〗备采购网
                第六届图书馆论坛580*60

                现货人乙肝表╱面抗体ELISA 检测试剂盒的试验原理

                教育装备采购网※ 2012-12-05 10:37 围观2584次

                  上海酶联生物科技有限公司专业供应ELISA试剂盒,试剂盒,检测试剂盒,人ELISA试剂盒,大鼠ELISA试剂盒,小鼠ELISA试剂盒,ELISA试剂盒,ELISA KIT,兔子ELISA试剂盒,豚鼠ELISA试剂盒,牛ELISA试剂盒,羊ELISA试剂盒,狗ELISA试剂盒,猪ELISA试剂盒,仓鼠ELISA试剂盒,试剂盒,检测试剂,抗体,细胞株培养基,肿瘤坏死因子,白介素2,干扰素,标准品,对照品,生物试剂,标志物,抑制因子,,抗原,琼脂,细胞生长因子等

                  人乙肝表面抗体ELISA 检测试剂盒

                  试验原理:

                  HBsAb试剂盒是夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知HBsAb浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将HBsAb和生物素标记◆的抗体同时温育。洗涤后,加入♂亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加ζ 入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中HBsAb的浓度呈比例关系。

                  自备材料

                  蒸馏水。

                  加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。

                  振荡器磁力搅拌器等。

                  安全性

                  避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请『尽快用水冲洗。

                  实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

                  不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

                  人乙肝表面抗体ELISA 检测试剂盒

                  操作注意〓事项

                  试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀︽稀过后的标准品应丢弃,不可保存。

                  实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。

                  不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

                  使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和↓底物A、B液时,避免使用带金属部分∏的加样器。

                  使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

                  洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

                  底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时←间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。

                  加入试剂的顺序◣应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。

                  按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

                  样品收集、处理及保存方法

                  血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集╲血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

                  血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

                  细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和ㄨ聚合物。

                  保存------如果样品不立即使〒用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血№。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

                  人乙肝表面抗体ELISA 检测试剂盒

                  操作步骤

                  使用前,将所有试剂充分混卐匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。

                  根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白◇孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。

                  加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测↑样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗¤体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。

                  甩去孔内♀液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗卐涤液,用吸水纸拍干。重复◤此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。

                  每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。

                  甩去Ψ 孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。

                  每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。

                  取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定⊙结果。

                  在450nm波长处测定各孔的OD值。

                  局限

                  6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。

                  试剂盒性能

                  1. 灵敏度:最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相∞关系数R值为0.990。

                  2. 特异性:不与其它细胞因子反应。

                  3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。

                  人乙肝表面抗体ELISA 检测试剂盒

                  结 果 判 断 与 分 析

                  1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读←取各孔的OD值

                  2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的HBsAb标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的HBsAb含量可♀根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

                  3、检测值范围:0-800IU/L

                  4、敏感度: 1.0 IU/LPhthalide 苯酞 [87-41-2] 100g

                  1200万,阴离子聚丙烯酰胺 [9003-05-8] 100g

                  Rhodamine B 罗丹明 B [81-88-9] 500g

                  Pyrogallol Red 焦酚红 [32638-88-3] 1g

                  Pyronin B 派洛宁B [2150-48-3] 5g

                  Safranin O 番红O [477-73-6] 25g

                  Red oil 土耳其红油 [8002-33-3] 500ml

                  Shikimic acid 莽草酸 [138-59-0] 1g

                  Silver chloride 氯化银 [7783-90-6] 25g

                  Silica gel plate Type GF 薄层层析硅胶板GF型 / 40片

                  Snailase 蜗牛酶 / 5g

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