液相色谱仪根据固定相是液体或是固体,又分为液-液色谱(LLC)及液-固色谱(LSC)。现代液相色谱仪由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器、信号记录系统等部分组成。与经典液相柱色谱装置比较,具有高效、快速、灵敏等特点。
液相色谱仪维护:
液相色谱仪使用时要非常的注意
使用卡套柱时,两端的卡套应时刻连接在柱芯上。不管您是平衡色谱柱或是清洗,任何时候都不能将卡套取下来,否则会造成填料的流失。
液相色谱∞柱使用注意:
卡套柱◣的安装(加预柱):
1.将卡套架套入柱芯
2.将两片夹套片嵌入柱芯的凹槽,使夹套☆高于柱芯(见下图)
3.将已套到柱芯上的卡套架向上推,直至高过夹套片
4.将"子弹头"预◥柱放入卡套片内
5.将卡套帽和卡套架旋在一起,然后用◆手拧紧
6.然后依同样的顺序连接好柱子的另一端
平衡色谱柱:
反相色谱柱在经过出厂测试后是保存在乙腈/水中的。请一定确保您所使用的流动相和乙腈/水互溶。由于色谱柱在储存或运输过程中可能会干掉,因此在用流动相分析样品之前,应使用10-20倍↑柱体积的甲醇或乙腈平衡色谱柱;如果您所使用的流动相中含有缓→冲盐,应注意用纯水"过渡"。
硅胶¤柱或极性色谱柱在经过出厂测试后是保存在正庚烷中的。如果该色谱柱需要使用含水的流动相,请在使用流动相之前用乙醇或异丙醇平衡
如何平衡色谱柱?
平衡过程中,将流速缓慢地提高用流动相平衡色∞谱柱直到获得稳定※的基线(缓冲盐或离子对试剂度如果较低,则需要较长的时间来平衡)
色谱柱的再生:
进行色谱柱再生时,应使用一个谦∑ 价的泵,我们建议最好不使用您的高效液相色谱仪上的泵。
注意:
在对NH2改性的色谱柱进行█再生时,由于NH2可能成铵根离子的形式存在,因此应该在水洗后用0.1M的氨水冲洗,然后再用水冲洗至碱溶液完全流出。如果简单的有机溶剂/水的处理不▼能够完全洗去硅胶表面吸附↙的杂质,用0.05M稀硫酸冲洗非常有效。
液相色谱柱的维护:
使用预柱保护分析柱(硅胶在极性流动相/离子性流动相中有一定的溶解度)
大多数反相色谱柱的pH稳定范围是㊣ 2-7.5,尽量不超过该色谱柱的pH范围
避免流动相←组成及极性的剧烈变化
流动相使用前必须经脱气和过滤处理
如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相,应在实验完毕柱子冲洗干净,并保存大乙腈中
压力升高是需要更换预柱的信号