经常使用液相色谱仪的操作人员一定都知道,在使用液相色谱仪的时候可能会出现一些故障,今天,笔者就来为大家解答液相色谱仪使用时常见的故障及解决方法。
液相色谱峰分叉怎么回事?
造成这种情况的原因一般是色谱柱被污染,或柱头填料塌陷导致的。对于第一种情况,先用纯水反向冲洗柱子,然后换成甲醇冲洗,接着用甲醇+异丙醇(4+6)冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定),再换成甲醇冲洗,然后用◆纯水冲洗,最后甲醇冲洗正向冲洗【柱子30分钟以上。如冲洗后依然出峰不佳,则考虑第二种情况。对︻于第二种情况,拧开柱头,检查柱填料是否硬结或塌陷。去除硬结部分(污↘染的填料),装★入新填料,滴一滴甲醇,填料下陷,再填,用与柱内径相∏同的顶端平滑的不锈钢杆压紧,再填平,滴甲醇,再压紧反复几次,直』至装满填平。柱头用甲醇冲洗干净,擦净柱外壁的填料,拧紧柱头,用△纯甲醇冲洗30分钟以上。
如何排除液相色谱仪气泡溢出的故障?
流动相内产生都无法清除不断产生的气泡,主Ψ 要是因为过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内〓,过滤器内部由于霉菌的生长繁殖,形成菌团,阻塞了过滤器,缓冲液难以流畅地通过过滤器,空气在泵的压力作用下经过滤器进入流动相。处理过滤器浸泡于5%硝酸溶液▃中,超声清洗几分钟即可;亦可将过滤器浸泡于5%硝酸溶液≡中12~36小时,轻轻震荡几次,再将过滤器用纯水↓清洗几次,打开泄压∏阀,打开purge键清洗脱气,如仍有气泡不断从过滤器冒出,继续将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中,如没有气泡不断从过滤器中冒出,说明过滤器内部的霉菌∞菌团已被硝酸破坏,流动相可以流畅地通过过滤器。打开泄㊣ 压阀,打开泵,流速调至1.0~3.0ml/min,纯水冲洗过滤器1小时左右。即可将过滤器清洗干净。关闭泄压阀,纯甲醇冲洗半小时即可。
自检时,为什么有时会出现“钨灯ζ 能量低”的错误?
一般来说,原因是●系统中有挡光物,光路偏离,钨灯电源系统或钨灯灯泡已坏。这时首先要检查光度室☉是否有挡光物;打开检测器光源室盖,检查氘╲灯是否点亮;如果氘灯不亮,则关机,更换新氘灯,换时,需注意型号;检查氘灯保险丝,看是◇否松动、氧化、烧断;如果故障,应立即更换;再开机重新自检〓;若仍出现上述故障,则重新安装软件后再进行自检。
出现压力波动大,流量不稳定该怎么办?
造成这种情况的原因是系统中有空气或者单向阀的宝石球和阀座︽之间夹有异物,使得两者不能密ξ 封。处理工作中注意观察流动相的量,保证不锈钢滤器沉入储液器瓶〖底,避免吸入∮空气,流动相要充分脱气卐。如为单向阀和阀座之间夹有异物,拆下单向阀,放入盛有丙酮的烧杯用超声波清洗。
液相色谱仪峰面积重复性不好怎么回事?
主要原因可能有进样阀漏液、加样针不到位或液量不∩足。针对第一◇种情况,处理时应对更换进样阀垫圈;对于第二种情况保证加样针插到底,注射样◢品溶液后须快速、平稳地从LOAD状态转换到INJECT状态,以保证进样量的准确。日常工◣作中,液相色谱仪的保养非常重要,如要注意不要让空▓气进入输液系统和高压泵中,储液器内的溶液如长☆时间未用应清洗储液器并卐更换溶液,每次用完色谱仪后缓冲液要用纯水冲洗干净,防止无机盐析出或沉积;样品的前处理也很重要,任何样品都要尽可能地去除杂质,完全溶解,尽量减少对色谱柱的污染,以延长色谱柱①的使用寿命,同时避Ψ 免注射过浓的样品溶液,以免残留液在进样阀内析出固体引起堵塞;色谱柱作好标记,用于不同分析目的的色谱柱不要混用等。
液相色谱柱压升高的原因是什么?
造成→柱压升高的原因很多。一般是由于柱床内产生了异常的占位性物体,造成流体阻力加大所引▅起的。例如,缓冲液盐分如(乙酸铵等)沉积♀于柱内,或样⊙品污染沉积。针对第一种情况,处理时应先用40~50℃的纯水,低速正向冲洗柱子,待柱压逐渐下降后,相应提高流速冲洗,柱压大幅度下降※后,用常温纯水冲洗,之后用纯甲醇冲洗∞柱子30分钟;对于第二种情况,由样品的沉积引起污染的C18柱,和纯水反向冲洗柱子,然后换成甲醇冲洗,接着用甲醇+异丙醇(4+6)冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定),再用换成ζ 甲醇冲洗,然后用纯水冲洗,最后甲醇冲♂洗正向冲洗柱子30分钟以上。