教育装备采购网：气相色谱可分为气固色谱和气液▓色谱。气固色谱指流动相是气体，固定相▲是固体物质的色谱分离方法。例如活性炭、硅胶等作固定相。气液色谱指流动相是气体，固定相是液体的色谱分离方法。例如在惰性材料硅藻土涂上一层角鲨烷，可以分离、测定纯乙烯中的微量甲烷、乙炔、丙烯、丙烷等杂质。

　　辛夷，又↑名紫玉兰、望春花，属木兰科木兰属落叶乔木[1]，其花蕾入药称辛夷。有散风寒、通鼻窍之功效[2]。辛夷挥发油是一种重要的天然香料，广泛用■于医药、日化和香精香料等行业[3]。辛夷挥发油的测定及化学∮成分的质谱分析∮已有报道，提取方法有水蒸气▼蒸馏法[4]、浸膏法[5]、超临界CO2流萃取法[6]等，以上方法提取辛夷中挥发油时，样品的破碎对桉油精的回收率有很大的影响[4]。桉油精是辛夷挥发油的重要组成部分，国内对辛夷药材桉油精含量测定的相关报道很少，2005版《中国药典》Ⅰ部附录ⅩC给出的桉油精含量测定法使用PEG20M+OV-17混装气相ㄨ色谱填充柱，适用于成分不太复杂的药材和中成药中桉油精含量测定。辛夷药材挥发∮油的成分复杂，《中国药典》的方法不能使与桉油精相邻的峰分离。因此，本实验选用FFAP毛细管柱建立了辛夷药材中桉油精含量的气相色谱内标测定方法，采用匀浆破碎回流提取有效地防止♂了辛夷药材中桉油精的挥发，确保了测定结◥果的真实性和准确性。

　　1仪◥器和材料

　　岛津GC-16A气相色谱仪、FID检测器、SePu3000色谱工作站;匀浆机(Thevirtiscompany.Newyork)，FFAP毛细管色谱柱。

　　辛夷药材由贵阳中医学院提供和鉴定，分别采自河南、广西和贵州。

　　化学对照品桉』油精ぷ(0788-9202、供含量测定用ぷ、中国药品生物制品检定所);苯乙烯(化学试剂、纯度大于99%、无╳干扰测定峰)。其它试剂均为分析纯♂。

　　2方法与结果

　　2.1对照品溶液的配制准确称取对照品桉油精适量，用甲醇溶解后置于10ml容量瓶中，配制成20mg/ml的储备液，精密取出0.050ml储备液于5.0ml的0.25mg/ml的苯乙烯-三氯甲烷内表液中，加水1ml，振摇提取0.5min，离心，下层有机相为对照品溶液。

　　2.2样品溶液的配制取辛夷药』材10g，精密称量于匀浆罐中，加水150ml，匀浆，浆液及洗涤匀浆罐的水一并转移到250ml蒸馏瓶中，加入环▲己烷5.0ml，于挥发油提取器[7]中回流提取4h，有机相收集于离心试管中，离心、将上清有机＠ 相转入10ml容量瓶中，分别用2.5，2ml环己烷洗用▽过的提取器收集管和离心试管，离心、将上层有机相＠ 一并转入10ml容量瓶中用环己烷定容为待测溶液，精密吸取待测∏溶液0.25ml，内标溶液5.00ml，于10ml具塞离心试管中，加水1.0ml，振摇提取0.5min，离心，下层有机相为供试品溶液。

　　2.3色谱条件用FFAP毛细管色谱柱(30mm×0.32mm，0.32μm);氮气(N2)为载气、柱前压80kPa;汽化■室温度240℃;检测器温度240℃;柱温：80℃保留6min，以40℃/min的速▽率升到220℃，保留2min;以苯乙烯∑为内标在火焰离子化检测器(FID)上测定▽桉油精含量。

　　根据对照品的保留时间定性，峰面积比计算桉油精的含量。

　　2.4色谱柱和内标物的选择分别用SE-30，SE-54，OV-1701和大口径、小口径的FFAP毛细管柱进行对照品和样品的测定。结果表明，桉油精在大口径、小口径的FFAP毛细管︻柱的峰形都很好，但样品经大口径︻的FFAP毛细管柱分离，有一小峰不能与内标物分开。经各种内标物醋酸乙酯、冰片、萘和苯乙烯比较表明，苯乙烯能与其它峰完全分开且在恰当时间出峰。因此，选择苯乙烯为内标，色谱柱为小口径□　的FFAP毛细管柱。

　　2.5前处理方法的选择经不同前处理方法比较桉油精的挥发损失试△验，结果表明：辛夷药材在40～45℃烘干4h，其中的桉油精挥发损失约30%;将辛夷药材在套环式撞击制样机中粉碎，撞击使样品破碎而同时发热，桉油精挥发损失30%以上;破碎的样品于烧杯中室温下敞开放置5d桉油精全部挥▂发。因此，本实验采用加●水匀浆破碎，回流提取分析辛夷药材中的桉油精含量，有效地防止了辛夷药材中桉油精的挥发，测定结果比干法粉∞碎的结果要高。

　　2.6提取时间的选择取辛夷药材10g，精密称量于匀浆罐中，加水150ml，匀浆，浆液及洗涤匀浆罐的水一并转移到250ml蒸馏瓶中，加入环己烷5.0ml，于挥发油提取器中回流提取，考察提取时间与提取率。

　　从表1可知，采用匀浆々破碎后，回流提取≤4h时，随蒸馏时间的增长，出油率增高，蒸馏时间>4h后，延长蒸馏时间，出油率变化不大，且可能影响按油精的质量。因此，辛夷药材的最佳蒸馏时间为4h。

　　2.7线性关◥系考察配制桉油精标准溶液系列，桉油精加入量分别为0.4，0.8，1.2，1.6，2.0，2.5，3.0mg，加水1.0ml，内标液5.00ml，振摇提取0.5min，离心，吸取下层2.0μl，注入气相色谱仪测定，以相对峰面积A’/对加※入桉油精m(mg)进行线性回归，在0.4～3.0mg范围内，线性方程为A’=0.6622m+0.0149(r=0.9997)。

　　2.8精密度试验与重现性实验取对照品溶液2.0μl，按色谱条件进行测定，连续进样5次，求出◥桉油精的相对峰面积，RSD为0.22%。

　　取同一个批号辛夷药材制成的供试品溶液5份各2.0μl，按色谱条件进行测定，连续进样5次，求出桉油精的相对峰▓面积，RSD为1.12%。

　　2.9回收率◥实验精密称取辛夷药材5g，共计9份，分别加入桉油精24.00，30.00，36.00mg，制备成供试品溶液，分别进样测定，记录色谱图。

　　2.10样品测定按本实验建立的方法测定了河南、广西和贵州不同产地的√辛夷药材，结果表明，不同产地的药材中桉油精的↘含量差异很大。

　　3结论

　　本实验建立的加水均浆制样有效地防止了辛夷药材中桉油精的挥发，确保了测定结果的可靠性。

　　通过对十余批辛夷药材中桉油精的测定，表明本法具有良好的精密度和准确性，可用于辛夷药材的质量控制。

　　(谢沂楠/编辑)