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中文名：人垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)ELISA试剂盒
别名：人垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)ELISA Kit
供应商：上海古朵
规格：48t/96t
保存：2-8℃
有效期：6个月
范围：本试剂盒︻仅供科研使用，不得用于临床。
ELISA试剂盒种属：人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、猪犬、牛羊、鸡鸭、植物ELISA试剂盒等。
检测目的：用于测定血清，血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养卐上清、组织匀浆等标本。
产品用途：用于测定人血清,血浆,组织及相关液体样本中的含量或活性。
人垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)ELISA试剂盒免费代测 本试剂盒试剂盒组成及试剂配制：
1. 酶联板(Assay plate )：一块(96孔)。
2. 标准品(Standard)：2瓶(冻干品)。
3. 样品稀释液(Sample Diluent)：1×20ml/瓶。
4. 生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent)：1×10ml/瓶
5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent)：1×10ml/瓶。
6. 生物素标记抗体(Biotin-antibody)：1×120μl/瓶(1：100)
7. 辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin)：1×120μl/瓶(1：100)
8. 底物溶液(TMB Substrate)：1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液(Wash Buffer)：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸▲馏水稀释25倍。
10. 终止液(Stop Solution)：1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
人垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)ELISA试剂盒免费代测 本试剂盒液体类标本：
包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
1)血清：
室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集♀上清。保存过程中如有】沉淀形成，应再次离心。
2)血浆：
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细』收集上清。保存过程中如有沉淀形〖成，应再次离心。
3)尿液：
用无菌管收∮集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4)细胞培养上清：
检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/ 分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并 放出︾细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5)组织标本：
切割标本后，称取重量。加入◤一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4)，用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
人垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)ELISA试剂盒的若干特▆点：
专一性强：抗原与抗体的免疫反应是专一反应，而免疫酶技术以免疫反应为基础，所检测的对象是抗■原(或抗体)，使用的抗体除标记了酶以外，与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。
灵敏度高：由于抗体联结上了酶，因此，借助于酶与底物的显色反应，显示抗原与抗体的№结合，大大提高了检ㄨ测的灵敏性，使检测水平接近放射免疫测定法。
样品→易保存：经过酶反应显示的有色产物大多比较稳定，因此有利于样品的保存。
试剂的准备：
1. 标准品：标准品的系列稀№释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按▲下表中进行：
500pg/ml(6号标准品) 原倍浓度不用♂稀释直接加入50ul
250pg/ml(5号标准品) 100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释↙液
125pg/ml(4号标准品) 100ul的5号标准品加入100ul的标→准品稀释液
62.5pg/ml(3号标准品) 100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液
31.2pg/ml(2号标准品) 100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液
15.6pg/ml(1号标准品) 100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液
0pg/ml (空白对照) 原倍浓度不用稀释直接加入50ul
2. 洗涤缓冲液(50×)的稀释：蒸馏水50倍稀释。
试剂盒性能：
1. 灵敏度：最小的检∑测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性：不与其它细胞因子反应。
3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。
安全性：
1. 避∮免直接接触终止液和底物A、B，一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2. 实难中㊣ 不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
人垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)ELISA试剂盒操作步骤：
1. 使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
2. 根据待测样品◥数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数∞量来定，能使用复孔的尽量做复孔。
3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入▂待测样品50ul于反应孔内←。立即加入50ul的生物素↑标记的抗体。盖上膜板，轻轻振※荡混匀，37℃温育45分钟。
4. 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸↓拍干。重复此操作∩4次。如果用⌒洗板机洗涤，洗涤次数增加一次№。
5. 每孔加入100ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡☉混匀，37℃温育30分钟。
6. 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用◥洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育5分钟。避免光照。
8. 取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
9. 在450nm波长处测定各孔∩的OD值。
人垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)ELISA试剂盒注意事项∑ ：
1.试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过︻后的标准品应丢弃，不可保存。
2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂★不要混用。保质前使用。
4.使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试ζ剂盒里的各种成份及样品。
6.底物A应挥发，避免长〓时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手〖接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
7.加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时▃间一样。
8.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
