【中文名称】:人血管内皮抑素抗体(ES-Ab)ELISA试剂盒
【英文名称】:Human anti-Endostatin antibody,ES-Ab ELISA Kit
【产品规格】:96T/48T
【保存条件】:2-8℃低温保存
【保质期】:6个月,所有试剂盒均提供最新批次。
人血管内皮抑素抗体(ES-Ab)ELISA试剂盒组成:
试剂盒组成 |
48孔配置 |
96孔配置 |
保存 |
说明书 |
1份 |
1份 |
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封板膜 |
2片(48) |
2片(96) |
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密封袋 |
1个 |
1个 |
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酶标包被板 |
1×48 |
1×96 |
2-8℃保存 |
标准品 |
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2-8℃保存 |
标准品稀释液 |
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2-8℃保存 |
酶标试剂 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
样品稀释〓液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
显色剂A液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
显色剂B液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
终止液 |
3ml×1瓶 |
6ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
20倍浓缩洗涤液 |
20ml×1瓶 |
30ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
人血管内皮抑素抗体(ES-Ab)ELISA试剂盒特点:
1. 专一性强。抗原与抗体的免疫反应是专一反应,而免疫酶技术以免疫反应为基础,所检测的对象是抗原(或抗体),使用的抗体除标记了酶以外,与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。
2. 灵敏度高。由于抗体联结上了酶,因此,借助于酶与底物的显色反应,显示抗原↑与抗体的结合,大大提高了检测的灵敏性,使检测水平接近放射免疫测定法。
3. 样品易保存。经过酶反应显示的有色产物大多〒比较稳定,因此有利于样品的保存。
4. 结果易观察。对检测结果即可用肉眼观察,又可用显微镜观察,也可以用分光光度计进行比色测定,还可用显微镜∏观察。这是因为某些酶反应产物能使电子密度发生改变,从而引起被检测物的显示。
5. 可以定量测定。溶液中的抗原物质,应用酶免吸附技术进行比色测∑ 定,依据光密度值的变化,可以定量。预计用细︻胞分光光度计可对组织内的抗原进行免疫酶技术的定量测定。
6. 可以大规模测定样品。如有成千上万份样品需要进行检测,免疫酶技术都能在较短时间内完成。
7. 仪器和试剂简单。对免▲疫没技术来说,不需要荧光显微镜,也不需要测定放射性的特殊仪器,所用仪器及试剂均属一般性仪器与试剂,普通实验室及生产应用单位均易购置
人血管内皮抑素抗体(ES-Ab)ELISA试剂盒注意事项:
1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温均衡15-30分钟后方可运用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密々封袋中保存。
2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3. 各步加样均应使用加样器,并常常校对其准确性,以避免实☉验误差。一次加样时日最好控制在5分钟内,如标本数量多,举荐使用排枪加样。
4. 请每次◥测定的同时做标准曲线,最好做「复孔。如标本中待测◤物质含量过高(样板OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释必定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀
人血管内皮抑素抗体(ES-Ab)ELISA试剂盒操作步骤
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后〗从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第◢三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中ω 先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品◎稀释液50μl,混匀后从第七、第→八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为1200pg/ml,800pg/ml ,400pg/ml,200pg/ml,100pg/ml)。
2. 加样:分别设空白孔(空白比照孔不加样品及酶标试剂,其他各步操作相同)、待测◥样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为█5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不涉及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封△板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用≡。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔◣加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序丈量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后
标本收集注意事项:1) 在收集标本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足√够稳定。
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