常规的逆转录病毒纯化一般采用超速密度离心法(利用不同大分子,如DNA、蛋白、病毒颗粒、细胞碎片等具有不同的密度进行梯度离心而分离出来的原理)分离病毒颗粒,但是耗时耗力。而且,逆转录病毒的低滴度一直是其软肋。Cell Biolabs为此研制出的拥有专利技术的ViraBind™ 逆转录病毒纯化试剂,再结合新型的ζ 纯化装置,能在4-6小时内,每次能将100ml病毒上清纯化500-1000倍,从而获得109-1010TU/ml 感染滴№度的逆转录病毒颗粒。采用该Kit纯化获』得的逆转录病毒液,不含有游离的包装蛋白以及转▼导抑制物,因此卐非常有利于后继的逆转录病毒操作。
Cell Biolabs提供两种逆转录病毒纯化〓方案,一种是用纯化柱装置,另一种是PLUS的采︽用透析柱装置。前者ζ 纯化过程快速,只需3小时;后者采用了透析柱装置,时间上要过夜透析,但是纯度很高。具体纯化步骤及大概区别如Ψ下图所示:
逆转录病毒纯化&浓缩试剂盒(离心柱) 逆转录病毒纯化&浓缩试剂盒PLUS(透析柱)
Product Name Size Catalog Number
ViraBind™ Retrovirus Concentration and Purification Kit (100 ml/prep) 2 Preps VPK-130
5 Preps VPK-131
25 Preps VPK-131-5
Product Name Size Catalog Number
ViraBind™ PLUS Retrovirus Concentration and Purification Kit (50 ml/prep) 2 Preps VPK-135
ViraBind™ PLUS Retrovirus Concentration and Purification Mega Kit (500 ml/prep) 2 Preps VPK-136
10 Preps VPK-136-5
Cell Biolabs逆转录病毒浓缩纯化试剂盒中普通纯化逆转╲录病毒Kit每次纯化100ml,分2次/5次/25次三种规格;PLUS纯化Kit分中提(50ml每次)和大提(500ml每次),中提包装可使用2次,大〓提又分为2次和10次。每次能将100ml病毒上清纯化500-1000倍,从而获得 109-1010TU/ml感染滴度的逆转★录病毒颗粒。采用该Kit纯化获得的逆转录病毒液,不含有游离的包■装蛋白以及转导抑制物,因此非常有利于后继的逆转录病毒操作。