大豆胰蛋白酶抑制剂琼脂糖凝胶
品 名：大豆胰蛋白酶抑制剂琼脂糖凝胶（Soybean Trypsin inhibitor Sepharose，STI Sepharose FF）
目 录 号：NRPB10S
规 格：1 ml预装柱，5 ml预装柱，25 ml预装柱
贮 存：20%乙醇，2~8℃冰箱保存。
运 输：2~25℃、常压、避光。
保 质 期：5年。
相关介绍：
大豆』胰蛋白酶抑制剂琼脂糖凝胶是一种将大豆胰蛋白酶抑制剂（STI）键合在琼脂糖凝胶微↓球上形成的生物亲和层析分ξ 离介质。该产品保留了琼脂糖极好的亲水性及大网架◆结构，与生物活性◇大分子有很好的相容性，具有载量高、非特异性吸附少、流速∑快等特点，主要用于胰蛋白酶、糜蛋白酶和凝血X因子等丝氨酸蛋白酶的提取和∩纯化，也可以用于肠激酶的去除。
技术指标：
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基质 |
6%琼脂糖凝胶微球 |
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配基 |
STI |
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配基密度 |
＞6 mg/ml |
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填料粒径 |
45~165 μm |
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最大流速 |
750 cm/h |
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推荐流速 |
100 cm/h |
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工作（清洗）pH值 |
3~9（3~10） |
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耐反压 |
0.3 MPa |
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载量 |
≥30 mg胰蛋白酶/ml |
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保存条件 |
+2~8℃保存于20%乙醇溶液中 |
使用方法：
1. 装柱
1.1 根据分离目标的性质配制初始缓冲液（平衡液）和洗脱缓冲液。
1.2 将凝胶抽干，用蒸馏水洗涤2次去除保存☉时的乙醇，用蒸馏水配成匀浆并脱气。
1.3 将层析柱垂直固定，底端用水或缓冲液润湿并保∏持一段液位。
1.4 用玻璃Ψ棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱︼内，使凝胶在柱内自由↙沉降。
1.5 连结好柱子顶端活动柱头，打开蠕动泵，让缓冲液用操作流速流过5个柱体积，再使用1.5倍的操作流速「流过5个柱体积。调节适◢配柱头，使其尽量◣贴近胶面，最后用2~3个柱体积的缓冲液平衡柱子。
注意：（1）所有操作过ζ程不能引入气泡，保证装胶的均匀度。（3）如ω无条件做1.2步骤，填料层有气泡时可以进行2次装柱，去除保存ζ 时的乙醇和气泡。（4）乙醇等试剂配制的溶液需要脱气。
2. 平衡
用平衡缓冲液以操作流☉速平衡层析柱，观察检测器的变化，直到UV、pH值等参数不★变。推荐的平衡缓↙冲液为：50 mM Tris-HCl，500 mM NaCl，pH8.0。
3. 上样
切换转换阀进↑行上样，上样量根据样品的性质和层析介质的量⌒进行选择，也可以进行『线性实验找到最佳上样量。
样品的预处理：置换缓冲液，澄清过滤（0.45 μm、0.22 μm）等。
4. 冲洗
用2~3个柱体积的平衡缓冲液冲洗上样∑ 后的层析柱，观察检测器的变化，直到UV、pH值等参数不◆变。
5. 洗脱
一般用酸性缓冲液进行洗脱。推荐的洗脱缓冲液∞为：100 mM Glycine-HCl，500 mM NaCl，pH3.0。洗脱后的样品应尽快调节至中性，如可用1/10体积的2 M Tris-HCl （pH8.0）调节。
6. 清洗
可以用平衡缓冲液和〖洗脱缓冲液反复清洗。本填料的活性基团为蛋白质，不能耐♀受强酸、强碱和强有机溶剂的清洗。
