重组人碱性成纤维细胞生长因子亲和琼脂糖凝胶(rh-bFGF Sepharose)
品 名:重组人碱性成纤维细胞生长因子亲和琼脂糖凝胶(Recombinant Human bFGF Sepharose,rh-bFGF Sepharose)
目 录 号:NRPB04L、NRPB04S
规 格:25 ml,1 ml预装柱,5 ml预装柱
贮 存:20%乙醇,2~8℃保存。
运 输:2~25℃、常压、避光。
保 质 期:5年。
相关介绍:
碱性成纤维细胞生长因子(Fibroblast Growth Factor-basic,bFGF)又称FGF-2,能够与肝素相结╳合,属于FGF超家族的一员,在胚胎形成、组织再生、伤口愈合、中枢神经系♂统发育、血管生成和肿瘤发展等过程中发挥重要的作用。
很多中药在临床上被证明具有治疗癌症的功效,但其◣有效成分不明。将rh-bFGF偶联到琼脂凝胶填料制备成的rh-bFGF亲和琼脂糖凝胶填料预装柱可用于从中药中筛选能够同bFGF相互∑作用的药物分子,为中药抗癌有效成分的鉴定提供有效、快速的方△法。
技术指标:
基质 |
6%高度偶联的琼脂糖凝胶 |
配基 |
rh-bFGF |
配基密度 |
0.25~1.0 mg/ml |
填料粒径 |
45~165 μm |
最大流速 |
750 cm/h |
推荐流速 |
100 cm/h |
工作(清洗)pH值 |
3~9(3~10) |
耐反压 |
0.3 MPa |
保存条件 |
+2~8℃保存于20%乙醇溶液中 |
应用举例:捕捉与bFGF相互作用的分子
1) 1 ml rh-bFGF亲和琼脂糖●凝胶预装柱用20 mM PBS(pH7.4)平衡5~10个柱床〒体积;
2) 10 ml 三叶青饮片泡制液经0.45 μm滤膜过滤@后加载上柱;
3) 用20 mM PBS(pH7.4)平衡 5个柱〓床体积;
4) 用100 mM甘氨酸-HCl(pH2.7)洗脱4个柱床体积;
5) 自2/3柱ξ 床体积处开始收集1个柱床体积的洗脱液,并用中和缓冲液调节其pH至中性;
6) 用HSA亲和柱从三叶青饮片泡制液中分离与HSA结合的活性成分作为对照;
注意事项:
1) 预填柱使用简易方便,在没有仪器设备的条件下也可以完成纯化任务;
2) 样品洗脱后一般pH很低,应立刻用》碱性中和缓冲液(如1 M Tris-HCl,pH 9.0)将收集到的洗脱液中Ψ 和到中性,或在收集容器中事先装5%~10%、pH 9.0的缓冲液(如1 M Tris-HCl或1 M 磷酸缓冲液),以利于维持目标分子的生物活性,避免目标分子失活;
3) 使用时保证柱子和缓冲液的温度ξ一致,避免柱床内产生气泡,如果已经产生气泡,可以自行重装柱子;
4) 通常使用后应用4个柱床体积的0.1 M甘氨酸- HCl(pH 2.7)做再生处理,然而长期采用极端的洗脱条件将缩短亲和介质的使用寿命,每使用5次再生1次即可。
5) 本产品使用10次后最好先用20%乙醇洗5个柱床体积,然后再用70%乙醇洗脱5~10个柱床体积,可洗脱脂类和疏水性较强的蛋白质,恢复柱子的载量和流速。