品 名：重组蛋白G 琼脂糖凝胶
规 格：2 ml（50% slurry），4 ml（50% slurry），10 ml（50% slurry），20 ml（50% slurry），100 ml（50% slurry），200 ml（50% slurry），2 ml预装柱（50% slurry），4 ml预装柱（50% slurry），10 ml预装柱（50% slurry），20 ml预装柱（50% slurry）
相关介绍：
链球菌G蛋白（Streptococcus Protein G 简称SPG）是G、C型链球菌细胞壁中的一种蛋白质，能特异性地同免疫球蛋白IgG分子的Fc段结合而不影响其Fab段与抗原分子结合的能力，其亲和填料可以用▲于从血清、腹水、组织培养物等上清中结々合吸附并纯化免疫球蛋白（抗体）。
技术指标：
|
基质 |
6%高度偶联的琼ξ 脂糖凝胶 |
|
配基 |
重组蛋白G |
|
配基密度 |
4~5 mg/ml |
|
填料粒径 |
45~165 μm |
|
最大流速 |
300 cm/h |
|
推荐流速 |
50~150 cm/h |
|
pH稳定性 |
pH 3~9 |
|
耐反压 |
0.3 MPa |
|
载量 |
14~20 mg/ml兔多抗，25~30 mg/ml人多抗 |
|
保存条件 |
+4~8℃保存于20%乙醇溶液中 |
IgG与蛋白G的典型结卐合：
|
种类 |
亚类 |
结合蛋白G |
吸附缓冲液pH值 |
洗脱◇缓冲液pH值 |
|
人 |
IgG1 |
+++ |
6.0~7.0 |
3.5~4.5 |
|
IgG2 |
+++ |
6.0~7.0 |
3.5~4.5 |
|
|
IgG3 |
+++ |
8.0~9.0 |
≤7.0 |
|
|
IgG4 |
+++ |
7.0~8.0 |
2.5~4.5 |
|
|
牛 |
IgG2 |
+++ |
7.0~8.0 |
2.0 |
|
山羊 |
IgG2 |
+++ |
7.0~8.0 |
5.8 |
|
小鼠 |
IgG1 |
++ |
8.0~9.0 |
5.5~7.5 |
|
IgG2a |
+++ |
7.0~8.0 |
4.5~5.5 |
|
|
IgG2b |
+++ |
7.0 |
3.5~4.5 |
|
|
IgG3 |
+++ |
7.0 |
4.0~7.0 |
|
|
大鼠 |
IgG1 |
+ |
≥9.0 |
7.0~8.0 |
|
IgG2a |
+++ |
≥9.0 |
≤8.0 |
|
|
IgG2b |
+ |
≥9.0 |
≤8.0 |
|
|
IgG2c |
++ |
8.0~9.0 |
3.0~4.0 |
|
|
兔 |
IgG |
+++ |
7.4 |
2.7~4.0 |
注：+号的多少表示该类抗体与蛋︼白G结合的强弱程度。
应用举例：
结合缓冲液：20 mM磷酸盐缓冲液（PBS），pH 7.4
洗脱缓冲液√：0.1 M甘氨酸-盐酸缓冲液，pH 2.7
中和缓冲液：1 M Tris-HCl，pH 9.0
1) 1 ml重组蛋白G琼脂糖凝胶预填柱，用5~10个柱床体★积的蒸馏水洗去保存液；
2) 用结合缓冲∞液平衡 5~10个柱床体积；
3) 将5 ml兔多抗血清用结合缓冲液稀释至50 ml，0.45 μm滤膜过滤上样；
4) 用结合缓冲液平衡 5~10个柱床体积至基线；
5) 用洗Ψ脱缓冲液洗脱抗体，收Ψ集洗脱峰，并用中和缓冲液调节其pH至中性；
6) 每次使用后再用3~5个柱床体积的洗脱缓冲液再生清洗；
7) SDS-PAGE（图1）电泳分析洗脱下〓来的兔多抗纯度在95%以上。
注意事项：
1) 预填柱使用简易方便，在没有仪器设备的条件下也可以完成纯化◣任务；
2) 样品洗脱后一般pH很低，应↑立刻用碱性中和缓冲液（如1 M Tris-HCl，pH 9.0）
将收ζ集到的抗体溶液中和到中性，或在收集ω容器中事先装5%~10%、pH 7.5的缓冲
液（如1 MTris-HCl或1 M磷∞酸缓冲液），以利于维持抗体的生物活性，避免抗体失活；
3) 使用时保证柱子和缓冲☆液的温度一致，避免柱床内产生』气泡◆，影响纯化效果，如果
已经产生↙气泡，可以自行重↑装柱子；
4) 通常使用后应用0.1 M甘氨酸-盐酸缓冲液（pH 2.7）做再」生处理，然而长期采用极
端的洗脱条件将缩短亲和介质的使用寿命，每使用5次再生1次即可。
5) 本产品使用10次后最好先★用20%乙醇洗5个柱床体积，然后再用70%乙醇洗脱5~10
个柱床体积，可洗脱脂类和疏水性〓较强的蛋白质，恢复柱子的载量和流①速。
6) 本产品保☉存条件为20%乙醇，+4~8℃。
