磁¤珠法植物基因组DNA提取试○剂盒使用说明书
概述
本试剂盒采用具有独特分离作用的磁珠和缓冲液系统,从样品中分离纯化高质量基因组DNA,特殊包被的磁珠,在一定条件下对目的DNA具有很强的亲和力,而当条件改变时,磁珠释放吸附的DNA,能够达到快速分离纯化DNA的目的。整个过程不涉及有毒试剂,安全、便捷、提取的DNA纯度高。使用本试剂盒纯化的基因组DNA (OD260-OD320)/(OD280-OD320)均在1.7~2.0之间,可以应用到各类下游分子生物学实验。
Production.no | 名称 | 规格 | 储存条件 | 保质期 |
HRZW-010 | 磁珠法植物基因组DNA提取↘试剂盒 | 100T | 4℃ | 180天 |
适用范围
从植物组织中▓提取基因组DNA,适用于核酸自动卐化提取平台。
试剂盒包装及组成
试剂盒组成 | 数量 |
Buffer A | 60 ml×1瓶 |
Buffer B | 1.5 ml×1瓶 |
Buffer C | 1.5 ml×1瓶 |
磁珠Ψ 结合液 | 25 ml×1瓶 |
洗涤液Ⅰ | 50 ml×1瓶 |
洗涤液Ⅱ | 30 ml×1瓶,使用前加入80 ml无水乙醇,混匀 |
洗脱液 | 10 ml×1瓶 |
使用说明书 | 1份 |
注意事项
1.Buffer A低温储存可能会出现白色絮状漂浮物,使用前在恒温水箱中温育至白色沉淀完全溶∞解,不影响使用效果。
2.Buffer B 4℃保存,可能会析出白色粉末状沉淀,使用前混合均匀,不影响使用效果。
3.磁珠结合液用前一定要充分混匀。
4.如果〖下游实验对RNA污染比较敏感,可在裂解时加1µl RNaseA(10mg/ml)。
5.如果是干材料,取样量为10~20mg,适当延长裂解◣时间;如果材料是种子(可用粉碎机粉碎至☆粉末状),加入600µl
Buffer A,15 µl Buffer B、15 µl Buffer C,裂解时间为30min,其他操作不变▅。
6.如果同等取样量下欲得到更多DNA可以增加洗脱次数(洗脱次数♂最好不要超过3次),也可以适当延长裂解时间。
操作步骤
1.裂解
取新鲜→植物组织25~100mg,与研钵中稍加研磨。加入400~600µl Buffer A、5 µl Buffer B、10 µl Buffer C,研磨均匀,然后转移至1.5ml EP管中,混合均匀(可用卐漩涡振荡器,1200~1800rpm)。然后把EP管置于恒温水箱↑中65℃温育15~30min。
2.结合
将EP管从温※育设备中取出,12000r离心10min。取200 µl上清,加入振荡混匀的磁珠结合液250µl,颠倒混匀5min。将EP管置于磁力架上进行磁分离,吸弃废液,(吸净管盖及管底残↙液)。
3.洗涤
⑴ 加入500µl洗涤液Ⅰ,点振5~10次(若有团状或丝状物可增」加点振次数及力度),然后↓磁分离,吸净管盖及管底的残液;
⑵ 加入500µl洗涤液Ⅱ,点振5~10次(若有团状或丝状物◤可增加点振次数及力度),然后磁分离,吸净管盖及管底的残液;
⑶ 重复步骤⑵一次,室温下开盖干燥5min。
4.洗脱
加入100µl洗脱液,缓慢□抽吸混匀,65℃温浴10min。每隔2~3min轻摇EP管几下混匀。然后磁分离,小心吸取上清液至新①的EP管中,进行下游实验。