磁珠法DNA提取
磁珠法法医样本DNA提取试剂盒使用说明书
（骨骼、指甲、毛发等）
概述
本试剂盒采用具有独特分离作用的磁珠和缓冲液系统，从样品中分离纯化高质量基因组DNA，特殊包被的磁珠，在一定条件下对目的DNA具有很强的亲和力，而当条件改变时，磁珠释放吸附的DNA，能够达到快速分离纯化DNA的目的。整个过程操作便捷、提取的DNA纯度高靠，可以应用到各类下游分子生物学实验。
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Production.no |
名称 |
规格 |
储存条件 |
保质期 |
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HRFY-1201 |
磁珠法法医样本基因组DNA提取试剂盒 （骨骼、指甲、毛发等） |
100T |
4℃ |
180天 |
适用范围
适用于从少量骨骼、软骨、牙齿骨松质、指甲、毛发等提取痕量DNA，适用于自动化核酸提取平台。
试剂盒包装及组成
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试剂盒组成 |
数量 |
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Buffer A |
30 ml×1瓶 |
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Buffer B |
1.5 ml×2瓶 |
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Buffer C |
1.5 ml×2瓶 |
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磁珠 |
1 ml×1瓶 |
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洗涤液Ⅰ |
50 ml×1瓶 |
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洗涤液Ⅱ |
30ml×1瓶，使用前加入80 ml无水乙醇，混匀 |
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洗脱液 |
10 ml×1瓶 |
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使用说明书 |
1份 |
用户自备试剂
无水乙醇、异丙醇、10%SDS
注意事项
1.磁珠用前一定要充分混匀。
2.Buffer A、Buffer B、Buffer C 4℃保存，可能会析出白色粉末状沉淀，使用前混合均匀，不影响使用效果。
3.如果需要提取样品量更大或更小，可以等比例增加或减少Buffer A、Buffer B、Buffer C以及磁珠用量，洗脱液和洗涤液用量可以不改变。
4.如果同等取样量下欲得到更多DNA可以增加洗脱次数（洗脱次数最好不要超过3次），也可以适当延长裂解时间。
操作方法
骨松质、软骨基因组提取
1.裂解
用微型电钻小心钻去骨松质或用刀片刮取软骨2~10mg，研碎成粉末状，放入干净1.5ml EP管中，加入300ul BufferA、30ul BufferB，混合均匀（可用漩涡振荡器，1200~1800rpm）。然后把EP管置于恒温水箱中65℃温育，直至样品裂解完全为止。
2.结合
将EP管从温育设备中取出，直接加入ぷ振荡混匀的磁珠10ul，异丙醇200ul（自备），颠倒混匀5-10min。将EP管置于磁力架上进行磁分离，吸弃废液，（吸净管盖及管底残液）。
3.洗涤
⑴ 加入500ul洗涤液Ⅰ，颠倒清洗1-2min，然后磁分∩离，吸净管盖及管底的残◣液；
⑵ 加入500ul洗涤液Ⅱ，颠倒清洗1-2min，然后磁分离，吸净管盖及管底的残液；
⑶ 重复步骤⑵一次；
⑷ 室温下开盖干燥5min。
4.洗脱
加入100ul洗脱液，缓慢抽吸混匀，65℃温浴10min。每隔2~3min轻摇EP管几下混匀。然后磁分离，小心吸取上清液至新的EP管中，进行下游实验。
指甲痕量基因组①提取
1.裂解
取2~10mg指甲游离缘，放入干净2ml EP管内，加入10% SDS （自备）1.5ml，颠倒晃动浸泡30min，然后用超纯水清洗5-7次，用眼科剪将清洗后未干指甲剪成1mm×1mm左右小片¤段，放入干净1.5ml EP管内，加入300ul BufferA、30ul BufferB、30ul BufferC, 混合均匀（可用漩涡振荡器，1200~1800rpm）,然后把EP管置于恒温水箱中,一般来说指甲难裂解，建议56℃裂解过夜。
2.结合
将EP管从温育设备中取出，直接取300ul上清于新1.5ml EP管内，加入振荡混匀的磁珠10ul，异丙醇200ul（自备），颠倒混匀5-10min。将EP管置于磁力架上进行磁分离，吸弃废液，（吸净管盖及管底残液）。
3.洗涤
⑴ 加入500ul洗涤液Ⅰ，颠倒清洗1-2min，然后磁分离，吸净管盖及管底的残液；
⑵ 加入500ul洗涤液Ⅱ，颠倒清洗1-2min，然后磁分离，吸净管盖及管底的残液；
⑶ 重复步骤⑵一次；
⑷ 室温下开盖干燥5min。
4.洗脱
加入50ul洗脱液，缓慢抽吸混匀，65℃温浴10min。每隔2~3min轻摇EP管几下混匀。然后磁分离，小心吸取上清液至新的EP管中，进行下游实验。
毛发痕量基因组提取
1.裂解
取1-3根头发（含发囊，2cm左右），用眼科剪将其剪成2mm左右小片段，放入干净1.5ml EP管内，加入200ul BufferA、10ul BufferB、10ul BufferC，混合均匀（可用漩涡振荡器，1200~1800rpm），然后把EP管置于恒温水箱中65℃温育60min。
2.结合
将EP管从温育设备中取出，直接取上清200ul于新1.5ml EP管内，加入振荡混匀的磁珠10ul，异丙醇150ul（自备），颠倒混匀5-10min。将EP管置于磁力架上进行磁分离，吸弃废液，（吸净管盖及管底残液）。
3.洗涤
⑴ 加入500ul洗涤液Ⅰ，颠倒清洗1-2min，然后磁分离，吸净管盖及管底的残液；
⑵ 加入500ul洗涤液Ⅱ，颠倒清洗1-2min，然后磁分离，吸净管盖及管底的残液；
⑶ 重复步骤⑵一次；
⑷ 室温下开盖干燥5min。
4.洗脱
加入30ul洗脱液，缓慢抽吸混匀，65℃温浴10min。每隔2~3min轻摇EP管几下混匀。然后磁分离，小心吸取上清液至新的EP管中，进行下游实验。
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