磁珠法动物组织基因组DNA提取试㊣ 剂盒使用说明书
概述
本试剂盒采用♂具有独特分离作用的磁珠和缓冲液系统,从样品中分离纯化高质量基因组DNA,特殊包被的磁珠,在一定条件下对目的DNA具有很强的亲和力,而当条件改变时,磁珠释放吸附的DNA,能够达到快速分离纯化DNA的目的。整个过程不涉及有毒试剂,安全、便捷、提取的DNA纯度高。使用本试剂盒纯化的基因组DNA (OD260-OD320)/(OD280-OD320)均在1.7~2.0之间,可以应用到各类下游分子生物学实验。
Production.no |
名称 |
规格 |
储存条件 |
保质期 |
HRDW-020 |
磁珠法动物组织基因组DNA提取试剂☉盒 |
100T |
4℃ |
180天 |
适用范围
从动物组织中提取基因组DNA,适用于核酸自动化提取平台。
试剂盒包装及组成
试剂↑盒组成 |
数量 |
Buffer A |
30 ml×1瓶 |
Buffer B |
1 ml×2瓶 |
磁珠结合液 |
30 ml×1瓶 |
洗涤液Ⅰ |
50 ml×1瓶 |
洗涤液Ⅱ |
30 ml×1瓶,使用前加入80 ml无水乙醇,混匀 |
洗脱液 |
10 ml×1瓶 |
使用说明书 |
1份 |
注意事项
1.磁珠结合液用前一定要充分混匀。
2.裂解完成后如果仍有肉眼可见组织块,可12000转离心10min,取200µl上清进行◆下一步实验。若无肉眼可见组织块可直接进行下一步实验。
3.研磨时∑尽量迅速,避免DNA降解,也可以将研钵置于-20℃预冷20min。
4.如果是培养细胞,建议细胞液取200µl,Buffer A加200µl,磁珠结合液400 µl,其●他试剂用量不变。
5.如果同等取样量下欲々得到更多DNA可以增加洗脱次数(洗脱次数最好不要超过3次),也可以适当延长裂解时间(至所有组☉织块全部溶解)。
操作方法
1.裂解
取动物组织5~30mg,于研钵中稍加研磨,加入300uL BufferA、20uLBufferB,充分研磨后转移至1.5mLEP管中,混合均匀(可用漩涡振荡器,1200~1800rpm)。然后把EP管置于恒温水箱中65℃温育10~15min。
2.结合
加入振荡混匀的磁珠结合↘液300uL,颠倒混匀5min。将EP管置于磁力架上进行磁分离,吸弃废液(吸净管盖及管底残液)。
3.洗涤
⑴ 加入500µl洗涤液Ⅰ,点振5~10次(若有团状或丝状物可增加点振次数及力度),然后磁◢分离∩,吸净管盖及管底的残∩液;
⑵ 加入500µl洗涤液Ⅱ,点振5~10次(若有团状或丝状物可增加点振次数及力度),然后磁〓分离,吸净管盖及管底的残液,
⑶ 重复步骤⑵一次,室温下开盖干燥5min。
4.洗脱
加入50~100µl洗脱液,缓慢抽吸混匀,65℃温浴10min。每隔2~3min轻摇EP管几ζ下混匀。然后磁分离,小心吸取上清液至新的EP管中,进行♂下游实验。
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