磁珠法海洋生物基因组DNA提取试剂盒使用说明书
概述
本试剂盒采用具有独特分离作用的磁珠和缓冲液系统，从样品中分离纯化高质量基因组DNA，特殊包被的磁珠，在一定条件下对目的DNA具有很强的亲和力，而当条件改变时，磁珠释放吸附的DNA，能够达到快速分离纯化DNA的目的。整个过程不涉及有毒试剂，安全、便捷、提取的DNA纯度高。使用本试剂盒纯化的基因组DNA 纯度高，可以应用到各类下游分子生物学实验。
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Production.no |
名称 |
规格 |
储存条件 |
保质期 |
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HRHY-110 |
磁珠法海洋生物基因组DNA提取试剂盒 |
100T |
4℃ |
180天 |
适用范围
从海洋生物中提取基因组DNA，适用于核酸自动化提取平台
试剂盒包装及组成
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试剂盒组成 |
数量 |
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Buffer A |
60 ml×1瓶 |
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Buffer B |
1 ml×1瓶 |
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磁珠结合液 |
25 ml×1瓶 |
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洗涤液Ⅰ |
100 ml×1瓶 |
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洗涤液Ⅱ |
30 ml×1瓶，使用前加入80 ml无水乙醇，混匀 |
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洗脱液 |
10 ml×1瓶 |
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使用说明书 |
1份 |
注意事项
1.Buffer A低温储存可能会出现白色絮状漂浮物，使用前在恒温水箱中温育至白色沉淀完全溶解，不影响使用效果。
2.Buffer B 4℃保存，可能会析出白色粉末状沉淀，使用前混合均匀，不影响使用效果。
3.磁珠结合液用前一定要『充分混匀。
4.如果下游实验对RNA污染比较敏感，可在裂解时加1µl RNaseA（10mg/ml）。
5.如果同等取样量下欲得到更多DNA可以增加洗脱次数（洗脱次数最好不要超过3次），也可以适当延长裂解时间。
操作步骤
1.裂解
取新鲜材料5～30mg，与研钵中稍加研磨。加入400～600µl Buffer A、10µl Buffer B、，研磨均匀，然后转移至1.5mlEP管中，混合均匀（可用漩涡振荡器，1200～1800rpm）。然后把EP管置于恒温水箱中65℃温育30min。
2.结合
将EP管从温育设备中取出，12000r离心10min。取200µl上清，加入振荡混匀的磁珠结合液250µl，颠倒混匀5min。将EP管置于磁力架上进行磁分离，吸弃废液，（吸净管〗盖及管底残液）。
3.洗涤
⑴ 加入500µl洗涤液Ⅰ，点振5～10次（若有团状或丝状物可增加点振次数及力度），然后磁分离⌒ ，吸净管盖及管底的残液；
⑵ 重复步骤⑴一次
⑶ 加入500µl洗涤液Ⅱ，点振5～10次（若有团状或丝状物可增加点振次数及力度），然后磁分离，吸净管盖及管底的残液；
⑷ 重复步骤⑶一次，室温下开盖干燥5min。
4.洗脱
加入50～100µl洗脱液，缓慢抽吸混匀，65℃温浴10min。每隔2～3min轻摇EP管几下混匀。然后磁分离，小心吸取上清液至新的EP管中，进行下游实验。
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