KAPA2G快速热启动DNA聚合酶基于新一代聚合酶，具有内在比野生型Taq DNA聚合酶和其ξ它DNA聚合酶更快速合成DNA的能力。使用KAPA2G快速热启动DNA聚合酶的快速PCR程序基于延伸时间缩短，从而显著缩短了PCR循环的时间而不改变反应的表现。

      使用KAPA2G快速热启动DNA聚合酶，对于小于1 kb的人基因组DNA片段，少到一个目标拷贝，总共1秒的延伸时间已经足够了。对于大于1 kb的扩增子，每个循环用15秒/kb的延伸时间。
  

      使用KAPA2G快速热启动DNA聚合酶从人基因组DNA10倍稀释系列扩增的表皮生产因子受体的一个626 bp片段（左图）和巨噬细胞刺激因子1的一个1.3 kb片段（右图）。在每25ul反应物中加0.5单位的酶。使用机器的型号是G-Storm GS1，采用标准的3步法（35个循环）。对于626 bp片段每个循环总延伸时间是1秒，对于1.3 kb片段延伸时间是15秒/kb（每个循环20秒）。

      KAPA2G快速热启动DNA聚合酶结合优化的缓冲液能够显著缩短延伸时间和带来优异的表现。野生型Taq DNA聚合酶组成的热启动聚合酶在延伸时间缩短的情况下表现不能令人满意，与之相反，KAPA2G快速热启动DNA聚合酶的独特性质使其在总反应时间缩短40 - 70%时依然能够有效扩增。

        
      使用KAPA2G快速热启动DNA聚合酶或者竞争者野生型Taq DNA聚合酶组成的热启动聚合酶快速扩增7个人基因组DNA片段。反应物（25ul）包含5 ng人基因组和0.5单位的酶（KAPA2G快速热启动DNA聚合酶或者竞争者I）或0.625单位的酶（竞争者A)。使用机器的型号是Eppendorf Mastercycler epgradient S，采用标准的3步法（35个循环），每个循环变性15秒，复性15秒，延伸时间是1秒。对于KAPA2G快速热启动DNA聚合酶和竞争者I，起始变性/酶恢复活性时间是2分钟。对于竞争者A是7.5分钟。对于KAPA2G快速热启动DNA聚合酶和竞争者I，总反应时间是29.5分钟。对于竞争者A是37分钟。

      目的基因名称，长度和GC含量如下：1：5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶，50 bp, 54.0% GC; 2 ：锌指蛋白638，318 bp, 30.9% GC; 3 ：attractin, 373 bp, 37.1% GC; 4 ：锌指蛋白41，502 bp, 42.5% GC; 5 ：PCI区域包含蛋白2，526 bp, 39.3% GC; 6：染色体6 ORF167, 599 bp, 35.6% GC 和 7：表皮生长因子受体，626 bp, 42.0% GC。

      即使在野生型Taq DNA聚合酶组成的热启动聚合酶优化的，慢延伸速率下（每个循环1分钟/kb），KAPA2G快速热启动DNA聚合酶的表现依然优于它。这种新一代酶的独特性质加上热启动的专利抗体和优化的缓冲液能够比竞争的酶更加快速有效地扩增多种多样类型的扩增子。在以下的例子中，竞争的酶对于一系列40 - 60%的单个拷贝人类基因片段，要么不能扩增，要么表现很差，特别是当扩增子比较短或者GC含量比较高时（高于65%）。

        
      使用KAPA2G快速热启动DNA聚合酶或者竞争者野生型Taq DNA聚合酶组成的热启动聚合酶扩增5个人基因组DNA片段。反应物（25ul）包含5 ng人基因组和0.5单位的酶（KAPA2G快速热启动DNA聚合酶或者竞争者I）或0.625单位的酶（竞争者A)。对于GC含量大于65%的扩增子（#2和3),在反应物中加入7.5%DMSO。使用机器的型号是Eppendorf Mastercycler epgradient S，采用标准的3步法（35个循环），每个循环变性15秒，复性15秒。对于KAPA2G快速热启动DNA聚合酶，延伸时间是每个循环1秒，对于竞争的酶是每个循环60秒。起始变性/酶恢复活性时间和首次延伸时间按照厂家推荐的时间。每种酶的总反应时间如图所示。

      目的基因名称，长度和GC含量如下：1：5，10-亚甲基四氢叶酸还原酶，150 bp, 54.0% GC; 2 ：鸟嘌呤核苷酸结合蛋白, 241 bp, 83.8% GC; 3 ：RET原癌基因, 392 bp,79.1% GC; 4 ：锌指蛋白41, 502 bp, 42.5% GC 和 5：表皮生长因子受体, 626 bp, 42.0% GC。

       更加快速的多重PCR也可以使用KAPA2G快速热启动DNA聚合酶。由于多重PCR的复杂性，需要更长的复性时间，但是对于小于1 kb的片段，延伸时间可以缩短到每个循环10秒.采用优化的程序，可以节省35 - 70%的时间。多重PCR通常采用较高的模板浓度。使用KAPA2G快速热启动DNA聚合酶在1.5倍浓度的缓冲液，在所有测试的系统中，灵敏度都更高。
     

       
      使用KAPA2G快速热启动DNA聚合酶或者竞争者野生型Taq DNA聚合酶组成的热启动聚合酶通过多重PCR扩增人Duchenne肌肉失调基因的7个片段。反应物（25ul）包含100 ng（1，3和5道）或者10 ng（2，4和6道）女性人基因组DNA，0.25 uM各自的引物，3 mM Mg和一个单位的酶。KAPA2G快速热启动DNA聚合酶的反应在1.5倍浓度KAPA2G热启动缓冲液A中进行，竞争者的反应在1倍浓度反应缓冲液中进行。使用机器的型号是Eppendorf Mastercycler epgradient S，采用标准的3步法（30个循环），对于KAPA2G快速热启动DNA聚合酶和竞争者I，起始变性/酶恢复活性时间是2分钟，对于竞争者A是10分钟。对于KAPA2G快速热启动DNA聚合酶，每个循环由变性15秒，复性30秒和延伸10秒组成。对于竞争者，每个循环由变性30秒(95对)，复性30秒(55度)和延伸45秒(72度)组成.每种酶的总反应时间如图所示。