上海古朵生物为您讲述：植物碳酸酐酶(CA)ELISA试剂盒使用说明

　　第一、操作步骤

　　稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，依次进行稀释数倍。

　　加样：分别设ζ　空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品◢稀释液40μl，然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加▲样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

　　温育：用封板膜封板后置〓37℃温育30分钟。

　　配液：将30倍(48T 的20 倍)浓缩洗涤液用蒸馏水30倍︽稀释后备用

　　洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

　　加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

　　温育：操作同3。

　　洗涤：操作同5。

　　显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂「B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.

　　终止：每孔加终々止液50μl，终止反应(此时蓝色立转黄色)。

　　测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔←的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内▅进行。

　　第二、注意事项

　　1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

　　2. 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可╲在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3. 各步加样◥均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加〒样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加︼样。

　　4. 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值)，请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍卐数(×n×5)。

　　5. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉√污染。

　　6. 底物请避光保存。

　　7. 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须※以酶标仪读数为准.

　　8. 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

　　9. 本试剂不同批号◢组分不得混用。

　　10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

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