1.微载体选择：先用利用三种小量微载体做培养实验，观察细胞在一定时间内细胞的吸着率和计算细胞数，以得→到最大量细胞为佳。

　　2.水化：称一定量的微载体放入容器中，按每克微载体加50～100ml的比例，加入无Ca2+和Mg2+的磷酸缓冲液(PBS)，室温下放置卐应不少于↓3小时，并不时轻微搅动，然后再用新※鲜PBS洗一次。

　　3.消毒：可采用高压蒸汽消毒，也可在水化后用70%酒精浸泡消毒，再用无菌①的PBS漂洗一二次。

　　4.传代培养：在连续进行微载体培养时，可以不必把细胞从微载体分离下来，可将带有细胞的微载体和新的微载体混合进行培养细胞【能移动到新载体上。如果进行其它实验或需要分离细胞进行传代培→养时，和常规培养相同，先用EDTA+胰蛋白酶溶液作用使细胞脱离微载体表面。细胞脱离微载体后Ψ，可用自↑然沉降法，即在室温下静止5分钟，微载体将先自沉在底部，细胞大部分仍在上清中，然后离心上清即可得到细〖胞。如果需要分离程度较高【时，需用『孔径为100微米的尼龙网或不锈钢网过滤后，再离心滤过液，就可得到较纯∩净的细胞。