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                第六届图书馆论※坛580*60

                古朵生物详解:Elisa实验╲的洗涤方式

                教育装备采购网 2016-02-26 11:58 围观208次

                  古朵生物详解:Elisa实验的洗㊣ 涤方式

                  Elisa实验洗涤的方式除某些ELISA仪器配有特殊★的自动洗涤仪外,手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种,过程如下:

                  (1)浸泡式:

                  a.吸干或甩干孔内反应液;b.用洗涤液过洗一遍(将洗涤液∏注满板孔后,即甩去);

                  c.浸泡,即将洗涤液注满板孔,放置1-2分钟,间歇摇动,浸ξ泡时间不可随意缩短;

                  d.吸干孔内液体。吸干应彻底,可用水泵真空泵抽吸,也可〓甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干;

                  e.重复操作c和d,洗涤3-4次(或按说明规定)。在间接法中如本底较高,可增◤加洗涤次数或延长浸泡时间。

                  微量滴定板多采用浸泡式洗涤法。洗涤液多为含非离子型洗涤剂的中性缓冲液。聚☉苯乙烯载体与蛋白质的结合是疏水性的,非离子型洗涤剂既含疏水基团,也含亲水基团,其疏水基团与︼蛋白质的疏水基团借↓疏水键结合,从而削弱蛋白质与固相载体的结合,并ω借助于亲水基团和水分子的结合作用,使蛋白质回复到水溶液状态,从而脱离固相∴载体。洗涤液中的非离子型洗涤剂一般是》吐温20,其浓度可在0.05%-0.2%之间,高于0.2%时,可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低试验的①灵敏度。

                  (2)流水冲洗式流水冲洗法最初用于小珠载体▓的洗涤,洗涤液仅为蒸馏水甚至可用自来水。洗涤时附接一特殊装置,使小珠在流水冲击下不断▃地滚动淋洗,持续冲洗2分钟后,吸干液体,再用蒸馏【水浸泡2分钟,吸干即可。浸泡式犹如盆浴,流水冲洗式则好→比淋浴,其洗涤效果更为彻底,且也简便、快速。已有实验表明,流水冲洗式同样也适用于微量滴定板的洗涤。洗涤时设法加大水流量或加大水压,让水流冲击板孔表面,洗涤↑效果更佳。

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