大鼠纤维蛋白原（FIB）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 96T1.5μg /ml -48μg /ml使用目的： 本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中纤维蛋白原（FIB）含量。实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠纤维蛋白原（FIB）水平。用纯化的大鼠纤维蛋白原（FIB）抗体包被微孔板，制成固相抗ξ　体，往包被单抗的微孔中依次加入纤维蛋白 原（FIB），再与 HRP 标记的纤■维蛋白原（FIB）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物， 经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并◣在酸的作用下 转□化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的纤◇维蛋白原（FIB）呈正相关。用酶●标仪在 450nm 波长︻下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中大鼠纤维蛋白原（FIB）浓度。 试剂盒组成标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提╳取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能 马上进行试验〇，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 操作步骤1. 标准品的→稀释：本Ψ 试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进♀行稀 释。2. 加样：分别设空▂白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准▓品准确加样 50μl，待测样品孔▲中先加样品稀释液 40μl，然后再加待测样品 10μl（样品最终稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽 量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3. 温育：用封板『膜封板后置 37℃温育 30 分钟。4. 配液：将 30 倍浓缩洗↘涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用5. 洗涤：小心揭◥掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此 重复 5 次，拍干。6. 加酶：每孔加入酶标试剂 50μl，空白孔除外。7. 温育：操作同 3。8. 洗涤：操作同 5。9. 显色：每孔先加入显色剂 A50μl，再加入显色剂▓ B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10 分钟.10. 终止：每孔加终止液 50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11. 测定：以空』白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光△度（OD 值）。 测定应在加终∮止 液后 15 分钟以内进行←。操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD 值由标准曲线查出相应的↑浓度；再乘◥以稀释倍数；或用标准物的浓度与 OD 值计算出标 准曲线的直线回归方程式，将样品的 OD 值代入方程∏式，计算出样∩品浓度，再乘以稀∮释倍数， 即为样品的实♂际浓度。 注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未 用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会◣有结晶析出，稀释时☆可在水浴中加温助溶，洗涤╳时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次◣加样时间最好 控制在 5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加∩样。4． 请每次测定的同①时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本 OD 值 大于标准品孔第一孔的 OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计 算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。5． 封板膜只限一次性↘使用，以避免交叉污∏染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应√按传染物处理。9．本试剂不同批▽号组分不得混用。 保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6 个月