免疫组化方法的具体步骤为：1、取材：取实验组和对照组动物组织尽可能新鲜，PBS(磷酸盐缓冲液)洗，取小于0.5cm×0.5cm×0.1cm组织块；2、固定和包埋：用4%多聚甲∏醛进行固定，经70%乙醇涮洗、80%乙醇1小时、95%乙醇1.5小时两次、100%乙醇1小时两次、二甲苯透明20分钟两次、65℃石蜡中45分钟两次、用铜制模具包埋组织块； 3、切片：将厚度5um的组织切片附于经多聚赖氨酸附膜的载玻片上Ψ ，65℃烘烤4.5小时；4、脱蜡、入水：将切片浸于二甲苯中1.5小时(可◤减少看时间安排)、100%乙醇涮洗、100%乙醇涮洗、95%乙醇涮洗、80%乙醇涮洗、自来水冲洗；5、3%甲︾醇双氧水,室温30分钟,自来水洗，采用热修复方法（在微波炉上放入↓铁质盆，盆底放入垫板，盆里注入适量水，然后放入盛有片子和适量枸橼酸溶液¤的烧杯中，加热至铁盆里的水沸腾、降温。开始计时3-5min,然后将烧杯①拿出，放入冷水中进行冷却至常温即可拿出片子）之后放入PBS中，然后进行划蜡;