定义1：主要由々活化的单核/巨噬细胞产生，能杀伤和抑制肿瘤细胞，促进中性粒细胞吞噬，抗感染，引起发热，诱导肝细胞急性期蛋白合成，促进髓样白血病△细胞向巨噬细胞分化，促进细胞增殖和分化，是重要的炎症因子，并参与某些自身免疫病的病理损伤。 定义2：一种由巨噬细胞对细菌感染或其他免疫源反应自然产生的细胞因子。与干扰素协同作用可杀死肿瘤细胞。 定义3：主要由活化的单核/巨噬细胞产生，能杀伤和抑制肿瘤细胞的细胞因子。促进中性粒细胞吞噬，抗感染，引起发热，诱导肝细胞急性期蛋白合成，促进髓样白血病细胞向巨↙噬细胞分化，促进细胞增殖和分化，是重要的炎症介质，并参与某些自身免疫病的病理损伤。 肿瘤坏死由巨噬细胞分泌的∏一种小分子蛋白。TNF-α主要由单△核－巨噬细胞分泌；TNF-β主要由活化的T淋巴细胞∮分泌，两者有相似致热性。小剂量呈单峰←热，大剂量呈双峰热；TNF在体内外均能刺激IL-1的产生。不耐热，70℃ 30min失活简介：　　1975年Carswell等发现接︼种BCG的小鼠注射LPS后，血清中含有一种◆能杀伤某些肿瘤细胞或使体内肿瘤组织发生血坏死的因子，称为肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF)。1985年Shalaby把◤巨噬细胞产生的TNF命名为TNF-α，把T淋巴细胞产生的淋巴毒素（lymphotoxin,LT)命名为TNF-β。TNF-α又称恶质素。 TNF的产生：（1）TNF-α是一种单核↑因子，主要由单核细胞和巨噬细胞产生，LPS是较强的刺激剂。IFN-γ、M-CSF、GM-CSF对单核∮细胞/巨噬细胞产生TNF-α有↘刺激作用，而PGE则有抑制作用。前单核细胞系U937、前髓细胞系HL-60在PMA刺激下可产生较高水平的TNF-α。T淋巴细胞、T细胞杂∏交瘤、T淋巴样々细胞系以NK细胞等在PMA刺激下也可分泌TNF-α。SAC、PMA、抗IgM可刺激正常B细胞产生TNF-α。此外，中性粒细胞、LAK、星状细胞、内皮细胞、平滑肌细胞亦可产生TNF-α。 （2）TNF-β是一种淋巴因子，抗原和丝裂原均∴可刺激T淋巴细胞分泌TNF-β。PMA刺激RPMI1788B淋巴母细胞可分泌高水平TNF-β。 TNF的分子结构和基因：（1）人的TNF-α基因长约2.76kb，小鼠为2.78kb，结▲构非常相似，均由4个外显子和3个内含子组成，与MHC基因群密切连锁，分别定位于第6对和第17对染色体上。1984年从HL-60、U937等细胞中克隆成功rHu TNF-α cDNA，并☆在大肠杆菌中获得高表达。 人TNF-α前体由233个氨基▲酸残基组成，含76个╳氨基酸残▃基的信号肽▅，切除信号肽后成熟型TNF-α为157氨基酸残基，非糖基化，第69位和101位两个半胱氨卐酸形成分子内二硫键。rHu TNF-α分子量为17kDa。小鼠TNF-α前体为235氨基酸残基，信号肽79氨基酸残基，成熟的小鼠TNF-α（rMuTNF-α）分子量为17kDa，由156个氨ξ　基酸残基组成↓，第69位和100位两个半胱氨酸形成分子内二硫键，有一个糖基化点，但糖基化不影响其生物学功能。rHu TNF-α与rMu TNF-α有79%氨基酸组成同』源性，TNF-α的生物学作用似无明显的种属特异性。最近有人报道通过基因№工程技术表达了N端少2个氨基酸（Val、Arg）的155氨基酸人TNF-α，具※有更好的生物学活性和抗肿瘤效应。此外，还有用基因工程方法，将TNF-α分子氨基端♂7个氨基酸残基缺失，再将8Pro、9Ser和10Asp改为8Arg、9Lys和10Arg，或者再同々时将157Leu改为157Phe，改构后的TNF-α比天比天然TNF体外杀伤L929细胞的活性增加1000倍左右，在体内肿瘤出血坏死效应也明显增加。TNF-α和β发挥生物学效应的天然形式是同源的三聚体。 （2）人 和小鼠TNF-β基因分别定位于第6和第17号染色体。HuTNF-β分子由205个氨基酸残基组成，含34氨基酸残基的↘信号肽，成熟型Hu TNF-β分子为171个氨基酸残基，分子量25kDa。rHu TNF-β分子由202氨基酸残基组成，包括33个氨基酸残基的信号肽，成熟分子169个氨基酸残基，与Hu TNF-β有79%的同源性。Hu TNF-β与Hu TNF-αDNA同源序列达56%，氨⊙基酸水平上同源性为36%。 TNF的受体：（1）TNF-R的分型：　　TNF-R可分为两型：Ⅰ型TNF-R，55kDa，CD120a，439氨基酸残基，此型受体可能在溶细胞☉活性上起主要作用；Ⅱ型TNF-R，75kDa CD120b，426氨基酸残基，此型受体可能与√信号传递和T细胞增殖有关。两型TNF-R均包括▽胞膜外区、穿膜区和胞浆区三个部分，胞膜外区有28%的同源，但在有包浆区无㊣　同源性，可能与介导不同的信号转导途径〖有关。TNF-R属于神经生长因子受体（NGFR）超家族。TNF-α和TNF-β的受体可能是同一的。TNF-R存在于多◇种正常及肿瘤细胞表面，一般每个细胞受体数目有103～104，如ME-180肿瘤细胞系TNF-αR约2000/个细胞，Kd为2*10-10M。不同细胞表⌒　面TNF-αR的数目和亲和力似乎与细胞对TNF-α的敏感性并不平行。TNF-α与相应受体结合后信号传递的机理尚不清楚，可能与★活化蛋白激酶C（PKC），催化受体蛋白磷酸化有关。 （2）可溶性TNFRTNF结合蛋白（TNF-BP）是TNFR的可∑溶性形式，有sTNf RⅠ（TNF-BPI）和sTNFRⅡ（TNF-BPⅡ）两种。一般认为sTNFR具有局限TNF活性，或稳定TNF的作用，在细胞因子网络中有重要的调节作用。Seckiner 1988年发现发热患者尿中︼有TNF抑制物，分子量为33kDa。Olsson 1989年在慢性肾功不全患者血和尿中也发现有TNF-BP。TNF-BP可与TNF特异结合，抑制TNF活性，如抑制其细胞毒活】性和诱导IL-1产生，可促进皮下接种Meth A肉毒的生长，可见于正常妊娠尿中〖。炎症、内毒素血症、脑膜炎双球菌感ξ染、SLE、HIV感染、肾功不全时以及肿瘤时可升高。可溶性TNFR可有效地减轻佐剂性关节炎的病理改变以及败血症休克。 TNF的生物学活性TNF-α与TNF-β的生物〓学作用极为相似，这可能与分子结构的相似性和受体的同一性有关。但有某些生物学作用方面也有不同之处。 （1）杀伤或抑制肿瘤细∩胞　 TNF在体内、体外均能杀死某些肿瘤细胞（cytolytic action)，或抑制增殖作用（cytostatic action）。肿瘤细胞株对TNF-α敏感性有很大的差异，TNF-α对极少数肿瘤细胞甚至有刺激作用。用放线菌素D、丝裂霉素C、放线菌酮等处理肿瘤细ζ　胞（如小︾鼠成纤维细胞株L929）可明显增强TNF-α杀伤肿瘤细胞活性。体内肿◢瘤对TNF-α的反应也有很大的差异，与其体外细胞株对TNF-α的敏感性并不平行。同一细胞系可能有敏感株和抵抗株如L929-S和L929-R。此外，靶细胞内☆源性TNF的表达可能会使细胞抵抗外源性TNF的细胞毒Ψ作用，因此，通过诱导或抑制内源性TNF的表达可改变々细胞对外源性TNF的敏感性。巨噬细胞膜结合型TNF可能参与对靶细胞的杀伤作用。 　　TNF杀伤肿瘤的机理还不十分清楚，与补体或穿孔々素（perforin)杀伤细胞∞相比，TNF杀伤细胞没有穿孔现象，而且杀伤过程①相对比较缓慢。TNF杀伤肿瘤组织细胞可能与以下机理有关。 ①、直接杀伤或抑制作用：TNF与相应受体结合后向细胞内移，被靶细胞溶酶体摄取导致溶酶体稳定性降低，各种酶外泄，引起细胞溶解。也有认为TNFN激活磷▓脂酶A2，释放超氧化物而▆引起DNA断裂，磷脂酶A2抑制☉剂可降低TNF的抗病效应。TNF可或→改变靶细胞糖代谢，使细胞内pH降低，导致细胞死亡。 ②、通过TNF对机体免疫功能的调节作用，促进T细胞及其它杀伤细胞对肿瘤细胞的杀伤。 ③、TNF作用于血管内皮细胞，损伤内皮细胞或导致血管功能紊乱，使血管损伤和血栓形成，造成肿「瘤组织的局部血流阻断而发生出血、缺氧坏死。 （2）提高中性粒细胞的吞噬能力　　增加过氧化物阴离子产生，增强ADCC功能，刺激细胞脱颗粒和分泌髓过氧化物酶。TNF预先与内皮细胞培养可使其增加MHCⅠ类抗原、ICAM-1的表达，IL-1、GM-CSF和IL-8的分泌，并促进中※性粒细胞粘附到内皮细胞上，从而刺激机体ㄨ局部炎症反应，TNF-α的这※种诱导作用要比TNF-β为强。TNF刺激单核细胞和巨噬细胞分泌IL-1，并调节NHCⅡ类抗原的表达。 （3）抗感染　　如抑制疟原虫生※长，抑制病毒复制（如腺病毒Ⅱ型、疱疹病毒Ⅱ型），抑制病毒蛋白合成、病毒颗粒的产生和感染性，并可杀伤病毒感染细胞。TNF抗病毒机理不十分清楚。 （4）TNF是一▅种内源性热原质　　引起发热，并诱导№肝细胞急性期蛋白的合成。TNF引起发热可能是通过直接刺■激下丘脑体温调节中枢和刺激巨噬细胞释放IL-1而引起，还可通过IL-1、TNF-α刺激其它细胞产生IL-6。 （5）促进髓样白血病细胞向巨噬细胞分化　　如促进髓样白血病细胞ML-1、单核细胞白血病细胞U937、早幼粒白血病细胞HL60的分化，机理不清楚。TGF-β可抑制TNF-α多种生物学活【性，但不抑制TNF-α对髓样白血病细胞分化的诱╲导作用，甚至还有协同效应。 （6）促进细胞增殖和分化　　TNF促进T细胞NHCⅠ类抗原表达，增强IL-2依赖的胸腺细胞、T细胞增殖能①力，促进IL-2、CSF和IFN-γ等淋→巴因子产生，增强有丝分裂原或外来抗原刺激B细胞的增殖和Ig分泌。TNF-α对某些肿瘤细胞具有生长因子样作用，并协同EGF、PDGF和胰岛素的」促增殖作用，促进EGF受体表达。TNF也可促进c-myc和c-fos等与细胞增殖密切相关原癌基因的表达，引起细胞周期由Go期向G1期转变。最近报道INF-β（LT）是EB病毒转化淋巴母细胞的自分泌生长因子，抗LT抗体、sTNf R以及TNF-α能抑制EB病毒转化淋巴细胞的增殖。 　　IL-1、IFN-γ和GM-CSF对TNF的生物学作用有明显的增强作用，可能与增加ω　细胞TNF受体的表达有关。已报道一种抗TNF-α单克隆抗体，可模拟TNF-α的某些生物学作用，这种现象在其它∑因子中还尚未见到。 TNF与临床　　 应用TNF在治疗肿瘤等方面开始临床Ⅱ期试验，也可与IL-2联人事治疗肿瘤，目前认为全身用药的疗效不及局部用药，后者如病灶内注射，局部浓度高且■副作用也较轻。近年来』已采用TNF基因治疗开始对黑素瘤等肿瘤进行临床验证。值得重视的TNF又与临床某些疾病的发生有关。 　　（1）感染性休克：目前认为革兰氏○阴性杆菌或脑膜炎球菌引起的弥漫性血管内凝血、中毒性休克是由于细菌内毒素刺激机体产生过量TNF-α，引起发热，心脏、肾上腺严重损害，呼ω吸循环衰竭，甚至引起死亡，其TNF水平与病死率正相关。其发病机理可能是TNF刺激内皮细胞，导致炎症、组织损伤和凝血。TNF也是急性肝坏死的重要因素。病毒性暴发型◥肝衰竭外周血细胞诱生TNF，IL-1活性升高，且与病情程度相关。目前有关TNF介导ζ　内毒素性休克的机理还不很清楚。有认为TNF能促进前凝血酶原活性物质生成，抑★制内皮细胞凝血酶调节毒素休克。TNF抗体（抗血清或单克隆抗体）在小鼠、家兔和狒狒体内均有效地阻止致死性内毒素体克的发生。应用抗TNf McAb治疗脓毒症和化脓性休克已进入Ⅲ期□　临床试验，抗TNF嵌合抗体治疗细菌性感染也已开始∏Ⅰ期临床试验。 　　（2）恶液质：TNF-α又称恶液素（cachectin)，可诱发机体发生』恶液质。 　　（3）TNF与病毒复制的关系：TNF还具有类々似IFN抗病毒作用↘，阻止病毒早期蛋白质的合成，从而抑制病毒的复制，并与TNF-α和TNF-γ协同抗病毒作用。另一方面，TNF诱导HIV-Ⅰ基因在T细胞中表达。TNF和HIV感染的CD4+细胞中活化或诱导NF-κB，NF-κB结合于HIV的长末端重复序列（LTR）的增强◥子部位，活化HIV基因，可能与艾滋病发病有关。艾滋病患者单核细胞TNF-α产生增加，血清中TNF-α水平升高。 肿瘤坏死因子药物类别： 抗肿瘤药 所属类别： 生物反应调◤节剂ㄨ 药物名称： 肿瘤坏死因子 英文名称： Tumor Necrosis Factor 药物别名： 序号 中文别名 英文别名 留可欣 制剂/规格： 序号 制剂 规格 注射剂(粉) 500万IU。 药理作用：TNF首先与一定时期的肿瘤【细胞质膜表现特异性受体结合，在细胞表面形☉成帽状聚集而入细胞，进入细胞后沿微管移动与溶酶体结合，在TNF作用下溶酶体破裂，释放出溶酶体酶致使细胞自溶。临床已证实TNF对多种肿瘤具有细胞毒¤和抑制生长作用，且对正常组织细胞无影响，也无种属特△异性，其◥生物活性有：①借助机「体免疫功能，对同一肿瘤产生直接和间接双重活性的抗癌效应，并使营养血管出血坏死；②刺激纤维母细胞增殖；③抑制脂蛋白的脂质活性；④诱导产生IL-2及IL-6；⑤增强中性粒细胞对血管内皮的粘附性；⑥增进凝血因『子及组织因子的活性；⑦产生菌溶刺激因子等。在体外对人类肿瘤细胞(如鼻咽癌、子宫癌、白血病等)有直接抑制增殖作用。在体内可引起肿瘤坏死、瘤体缩小以致消失。 药动学： 重组人TNF-α的药代动力学研究发↘现，给小鼠肌№内注射该药后，很快进入血液循环，O.5小时▆达高峰，主要分布在肝、肾、皮肤及胃肠道内∑　，半衰期为1小时。 适应症： 已进行了Ⅰ、Ⅱ期及Ⅲ临床试验。用于胃癌、大肠癌、胆囊癌、B细胞淋巴瘤、肝癌伴腹水及晚期转移癌等。 用法用量：Ⅰ期临床试验FNF最大耐受剂量为200μg/m2，用法为<200μg/m2(试█用剂量为每次150-200μg/m2)，每周2次，共4周8次，瘤内注射、肌内、静脉或皮下注射。 不良反应： 1. 静注时可出现高热【，可伴低血压反应。 2. 可能有流感样症状，如寒战、关节及周身痛等。 3. 还可有恶心∩、呕吐、腹泻、一过性转氨酶升高、血小板及白细胞减少等，停药后症状迅速消退。一般消炎痛可减轻发热反应。 相互作用： 1.TNF与干扰素合用▼，既可减轻不良反应，又对杀伤肿瘤细胞起相辅相成的作用。 2.与抗肿瘤药物(如5-FU等)合用可明显增强抗肿瘤效果。 3.与热疗合用可提高TNF的抗肿瘤疗效。 注意事项： 　　疗效评价： TNF与IL-2、IF-α、高温疗法、某些抗肿瘤药合用均有协同抗肿↑瘤效应。与手术、放疗、化疗结合，用于胃癌、大肠癌、胆囊癌及晚期转移癌等。如有报道用№OK-432诱导下TNF治疗胃癌合并腹水，第1次刺激〖是用OK-432，一次10KE注入腹腔，隔日1次，共4次。第13天为第2次刺激，腹腔1次注入OK-432 50KE，第19天腹水可消失。一般全身应用TNF疗效不如局部应用，对肿瘤局部注射的缓解率可达40%。TNF的总疗效还需进一步扩←大临床研究再作评价。 最新产品：bs-13505R G蛋白偶联受体151抗体|GPR 151bs-13506R G蛋白偶联受体77抗体|GPR77bs-13324R 精神发育迟滞相关蛋白Rab GDI α抗体|GDI1bs-13325R 甘油磷酸二酯酶◆磷酸结构域4抗体|GDPD1bs-13342R D-果糖6磷酸转移酶2抗体|GFPT2bs-13261R GA结合蛋ζ白转录因子α/GABP-α抗体|GABPAbs-13262R GA结合蛋白转录因子β/GABP-β1/GABP-β2抗体|GABPB2bs-13263R 谷氨酸脱羧酶65+谷氨酸脱羧酶67抗体|GAD65 + GAD67bs-13264R 谷氨酸脱羧酶样蛋白1抗体|GADL1bs-13253R 葡萄糖-6-磷酸酶3/G6Pase-β抗体|G6PC3bs-13254R α葡萄︾糖苷酶/溶酶体α-葡糖苷酶抗体|GAAbs-13255R 生长因子受体结合蛋白2相关蛋白3抗体|GAB3bs-13256R 生长因子受体结合蛋白2相关蛋白4抗体|GAB4bs-13257R G氨基丁酸受体pi/GABAA Rπ抗体|GABA A receptor pibs-13258R 磷酸化G氨基丁酸B型受体2抗体|phospho-GABBR2 (Ser884)bs-13241R G蛋白偶联受体结合蛋白α11/Gα 11 抗体|GNA11bs-13252R G3BP2蛋白抗体|G3BP2bs-13259R γ氨基∞丁酸运载蛋白2抗体|GABA Transporter 2bs-13317R β1-6 N-乙酰氨基葡萄糖转Ψ 移酶3抗体|GCNT3bs-13319R β1-6 N-乙酰氨基葡萄◥糖转移酶7抗体|GCNT7bs-13320R γ-微管蛋白GCP4抗体|GCP4bs-13321R γ-微管蛋白GCP6抗体|GCP6bs-13322R β-葡萄糖◣苷酶1抗体|GCS1bs-13323R 甘氨酸裂解系统H蛋白抗体|GCSHbs-13326R 15号染色ω　体开放阅读框58抗体|GDPGP1bs-13335R 淀粉结合域蛋白1抗体|Genethonin 1bs-13338R 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