实验方法原理
Western免疫印迹(Western Blot)是将■蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测的方法。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过≡融合部分的抗体检测。
与Southern或Northern杂交方法类似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。
经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽□ 类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免∞疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色◣或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基ω 因表达的蛋白成分。该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。
注意事项
1. 一抗、二抗的稀释度、作用时间和温度对不同的蛋白要经过预实验确定最佳条件。
2. 显色液必须新鲜※配置使用，最后加入H2O2。
3. DAB有致癌的潜在可能，操作时¤要小心仔细。
