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                人登革热抗体 (DF Ab)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书

                教育装备采购网 2014-11-25 09:18 围观345次
                本试剂盒用于测定人血清,血浆〗及相关液体样本中登革热抗体 (DF Ab)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人登革热抗体 (DF Ab)水平。用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被单抗的微孔中依次加入登革热抗体 (DF Ab),再与HRP标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶△标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的登革热抗体 (DF Ab)呈正相关。用酶标仪ぷ在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人登革热抗体 (DF Ab)浓度。样本处理及要求:1. 血清:室温血】液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程∩中如出现沉淀,应再次离心█。2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程◥中如有沉淀形成,应该再次离心。3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4. 细胞培养上清◣:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液︻,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5. 组织标本:切割标√本后,称取重量。加入●一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化〓后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6. 标本采╳集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后ξ应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶♀的(HRP)活性。
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