其它名称:骨胶原酶/胶原蛋白水解酶
英文名称:Collagenase
CAS 编号:9001-12-1
代理品牌:sigma,Amresco,Spectrum
供 应 商:上海恒远生物科技ξ 有限公司
胶原酶的化学本质是一种蛋白质,因此,这对温度、PH和导致蛋白质变性的各种因素均非常敏感,极易受到外界条件的影响而改变其本身的构№象和性质。
多种类型的胶原酶 | 区别应用 |
胶原酶I型 | 主要用于上皮、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的分离。 |
胶原酶II型 | 适用于肝脏,骨,甲状腺,心脏和唾液腺组织细〇胞的分离。 |
胶原酶IV型 | 胶原酶Ⅳ包含至少7中蛋白酶成〓分,分子量从68-130KD不等。它√能消化多种组织。 |
胶原酶V型 | 胶原酶Ⅴ包含至少7中蛋白酶成分,分子量从68-130KD不等。它可用于胰腺小岛组织的分离,将结缔组织分离成单个细胞。 |
1.将漂洗、修剪干净≡的组织剪成1~2mm左右小块
2.将组织块放入离心管中加入30~50倍体积的胶原酶溶液,旋紧盖子。
3.将烧瓶放入37℃水浴或者37℃孵箱内,每隔3min振摇一次,如能放在37℃的恒温震▲荡水浴箱中则更好。消化时间与♂组织的类别很有关系,对于某些肿瘤々组织或其他较致密结缔组织,消化时间4~48h,对于容易消▲化的组织可以采用37℃震荡消化15~45min,也可以根据具体情况而定。如组织块已分散而失去块的形状,一经摇动即成细胞团或单个细胞,可以认为已消化充分▂。上皮组织经胶原酶消化后,由于上皮细胞对此酶有耐受性,可能仍有一些细胞团未完全分散,但成团的上皮细胞▓比 分散的单个上皮细胞更易生长,因此,如无特殊需要可以不必再进一步处◥理。
4.收集消化液,离心1000r/min,5min,去除上清,用Hanks液或者无血清培养液离心漂洗1~2次,去除上清,加培养液制成细胞悬液,接种培养瓶︼。