1.  L-A1c对GHb检测的影响     L-A1c为GHb的初期反应产物, 结构不▽稳定, 随血糖浓度而变化, 既可水解成为葡萄糖和Hb, 也可以继续反应生成更为稳定的醛胺。L-A1c不能反映平均血糖浓度, 但可影响GHb的●测定结果。硼酸盐亲和色谱法和免疫法不检测L-A1c, 故不受其影响。离子交换色谱法和电泳法则受L-A1c影响较大, Camargo 等研究发卐现L-A1c可使离子交换色谱法测定的GH b值比实际值高1. 64% 。最简单也是最耗时的去除L-A1c的方法是将全血样本用溶血剂处理, 将溶血产物置于37 的等渗液中孵育6个小时。

2.  Hb变异体对GHb检测的影响     据报道Hb有700余种变◆异体, 大多数起源于Hb 的α、β、γ、或δ链◥的点突变。许多新的Hb变异体并无表型异常。临床中最常见的Hb变异体是HbF、HbS 和H bC。
       （1）HbF     HbF是胚胎时期的Hb由2条α 链和2条γ 链组成。出生时, 70% 的Hb 是HbF, 6个月后降到5%以下。遗传性H bF持续存在的个体体内其浓度可达到总Hb的30% , 而β-地中海贫血和镰状细胞病患者体内HbF 的浓度占总Hb 的2% 到20% 变化不等。
       离子交换色谱法和亲和色谱法的检测结果不易受H bF 影响, 而免疫法受到HbF 的干扰较大。Roh lf ing 等 发现即使HbF浓度> 15%, B io-RadVariant  和Tosoh G7两种离子交换层析柱也不↑会受到影响。但CLC330 /385 亲和层析柱、DCA-2000免疫法、Tosoh2. 2+ 离子交换色谱法的测定结果偏低, 尤其当HbF> 20%时, 测得的GHb值可下降1%甚至更多。CLC330 /385亲和色谱法会受到H bF的干扰, 可能因为与HbA 相比, HbF的糖化速率较慢。HbF可使DCA-2000 免疫法的测定值偏低, 因为在HbF分子中HbA 的链被!链取代, 而!链氨基端起始的几个氨基酸与链不同, GHb抗体∩不能与H bF 的糖化位点相结合, 但总Hb 却包括了HbF。从Tosoh 2. 2 + 离子交换的色谱图可以看到HbF的峰未能从总峰的面积中分离, 导致测定值偏低。

（2）HbC     HbC在非洲裔美国人中检出率为2. 3%, 而在非洲的撒哈拉地区▃人群中的分布频率高达30%  。Lee 等用硼酸盐亲和色谱法计算糖化Hb占总Hb的百分比, 认为HbS不会对该法形成干扰。在离子交换色谱法中, 只有B ioRad Variant 不会受到HbS的影响, Tosoh G7和HA8160的测定值均偏低, 这与以前☆的报道相同。日本的报道也显示, 用离子交换色谱法检测含有HbS的样本时测定值低于硼酸盐亲和色谱法和免疫法。推测用离子交换色谱法检测时, 糖化HbC 可从A1c峰中分离出来, 但是非糖化的H bC 却不能从A0峰中分离, 导致HbA1c的测定值偏低。Lee等 还发现, HbC 的存在对新的酶法Norudia 和4种免法( DCA-2000、Unimate、T inaQuant !、AU640)的测定值均无影响。
       （3）HbS    Hb变异体有明显的地区、种族差异。在美国HbS是最常见的Hb 变异体,7. 8% 的非洲裔美国人患有此种镰状细胞病, 纯合子镰ζ　状细胞病患者约有50 000 人。在非洲的撒哈拉地区, 在检测GHb 的患者中约有三分之一可检出HbS 。
       亲和色谱法在含有HbS 的血样中也可准确检出HbA1c。HbS对离子交换色谱法的检测结果有不同的影响取决于所使用的方法和⌒平台。Tosoh2. 2+ 、Tosoh G7和HA8160 方法的测定结果不受HbS影响。HbS对B ioRad Variant高压液相系统的影响不确定, 有时GHb的值会偏高, 尤其在HbA1c范围较低时。也有时HbA1c的值◇不受影响, 可能与层析柱及试剂的批次不同有关。应用DCA-2000和T inaQuant进行检测时, 抗体对抗原决定簇的√识别能力会下降, 与前4~ 6个氨基酸有关, 不受HbS 的影响。用RocheUn imate进行免疫法测定时, 所用的抗体与DCA-2000 相同, 但测定的结果却明显偏高。Un imate法与DCA-2000不同, 是用胃蛋白酶裂解氨基末端的︽链, 然后测定肽片段的糖化 。推测可能抗体与HbS1c和HbC1c 肽片段结合的亲和力更高, 导致GHb值的假性偏高 。

3.  影响红细胞生存时间的因素对GHb检测结果的影响    GHb在红细胞内的合成进★程是缓慢连续进行的, 任何使红细胞寿命缩短的疾病都会导致GHb形成的时间也相应缩短, 致使检测结果也受到影响。某些基础疾病引起的继发性溶血往往使检测值偏低, 如肝硬化、脾肿大、糖尿病等。EPO 治疗及极度贫血患者的输血治疗也会影响GH b检测结果。不同的测定方法所形成的干扰各不相同。维生素C和维生素E 可抑制H b糖基化, 使测定ξ结果假性降低。Coban等 发现缺铁性贫血患者血糖浓度恒定、红细胞减少时, GHb 测定值升高, 用铁剂( 100mg /d)治疗3个月后, 由于幼红细胞的出现稀释了Hb浓度, 使GHb平均值由7. 4%降到6. 2% 。

4. 其他影响因素     年龄、种族、性别、空腹血糖、餐后两小时血糖等均是GHb测定准确性的独立影响因素。一般认为年龄与GH b 值无关, 但Pani 等对2473名正常人和3270 名血糖调节受损者进行GHb测定, 在调查性别、体重指数、空腹血糖、餐后2 h血糖ζ　等因素后, 认为年龄每增加1 岁, GHb测定值升高0. 03%。不同种族的糖化血红蛋白值不同, Herman等对3819名血糖调节受损者测定GHb, 在调整年龄、性别、教育、婚姻、血压等多项影响因素后, 美国白种人、西班牙裔Ψ人、亚洲裔人、印第安人的GHb 平均值分别为5.78% 、5. 93% 、6. 00%、6. 18% , 差异具有统计学意义。

5.  贮存温度对GHb检测结果影响     样本贮存时间、温度及GHb测定方法都与GHb检测结果有关。随着样♂本贮存时间延长, 测定结果会逐渐升高。与其他方▓法相比, 离子交换色谱法和硼酸盐亲和色谱法在任何温度下稳定性都较好。大多数检测方法的样本都可在- 70℃ 低温■冻干条件下保存1年, 检测结果不受影响 。在4℃  时, 全血样本可保存1周,在室温条件下, 全血样本「稳定性较差, 只能保存数天。在37℃ 条件下, 未经任何处理的全血样本稳定性最差, 无论何种检测方法的样本有效保存时间均小于1 d

6. 常见的化学衍生物对GHb检测结果的影响    氨基甲酰Hb 在尿毒症患者血中浓度升高, 是←最常见的干扰GHb检测的化学衍生物。尿素在体内可自发地分离形成氨和氰酸盐, 氰酸盐经质子化作用后形成异氰酸, 异氰▅酸与蛋白质的α 和ε 氨基基团反应即形成氨基甲酰。Hbβ 链N 端的缬氨酸可与异氰酸发生特异性的结合反应, 形成稳定的氨基甲酰Hb。氨基甲酰Hb与HbA1c的等电点相似, 故可对依据电荷原理检测GHb的方法形成干扰。电ζ泳法对氨基甲酰H b非常敏感。在体内, 氨基甲酰化的Hb浓度超过5. 4% 时就会使离子交换法测定的GHb值发生极大的假性偏高。以离子交换色谱法检测GHb 的仪器有B io-Rad Variant、D iamat、Tosoh A1c2. 2+ 等。Lee 等发现, 用离子交换色谱法测定GHb 时, 如尿素浓度超过17mmo l/L, 每升高1
mmo l/L会使HbA1c值升高0. 04%。免疫法和亲和色谱法的仪器包括T inaQuant ! ( Roche)、DCA-2000( Bayer)、CLC 385( Primus)等, 不受尿毒症患者血中∞氨基甲酰Hb的影响。此外进行透析的尿毒症患者红细胞寿命会缩短, 也可影响GHb检测结果的准确性。