间接法是检测抗体常用的方法。其原理为利用酶标记的抗抗体(抗人免疫球蛋白抗体)以检测与固相抗原结合的受检抗体,故称为间接法操作步骤如下:
1)将特异性抗原与固相载体联结,形成固相抗原。洗涤除去未结合的抗原及杂质。
2)加稀释的受检血清,保温反应。血清中的特异抗体与固相抗原结合,形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后,固相载体上只留下特异性抗体,血清中的其他成份在洗涤过程中被洗去。
3)加酶标抗抗体。可用酶标抗人Ig以检测总抗体,但一般多用酶标抗人IgG检测IgG抗体。固相免疫复合物中的抗Ψ体与酶标抗体抗体结合,从而间接地标记上酶。洗涤后,固相载体上的酶量与标本中受检抗体的量正相关。
4)加底物↘显色
人睫状神经营养因子(CNTF)ELISA试剂盒标本收集注▓意事项:
1) 在收集标本前都必须有一个完整㊣的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。
2)我们提倡》新鲜标本尽早检测,对收集后及时进行检测。
1.检测原理:采用双「抗体夹心ABC-ELISA法
2.试剂盒保存:2-8℃(频繁使用时);-20℃(较长时间不用时)。
3.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
4.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
5.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
6. 不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。