解析人诱导型(iNOS)ELISA检测试剂盒说明
北京杰辉生物技术有限公司提供的elisa试剂盒种类繁多(囊括小鼠、大鼠、人、犬、鸡、猴子、牛 兔 猪 鸭 植物等种属),检测标本多样(血清、血浆、细胞上清液、组织匀浆等),为了便于客户更能了解人iNOS)ELISA检测试剂盒,特此归纳说明
人诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)捕获抗原的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
人诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA试剂盒组成
名称 96孔配置 48孔配置 备注
微孔酶标板 12孔×8条 12孔×4条 无
标准品(120 IU/ml) 0.5mL 0.5mL 按说明№书进行稀释
标准品稀释液 6mL 3mL 按说明书进行稀释
样本稀释液 6mL 3mL 按说明书进行稀释
检测抗体-HRP 6mL 3mL 无
20×洗涤缓冲液 20mL 20mL 按说明书进行稀释
底物A 6mL 3mL 无
底物B 6mL 3mL 无
终止液 6mL 3mL 无
封板膜 2张 2张 无
说明书 1份 1份 无
自封袋 1个 1个 无
注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:120、60、30、15、7.5、0IU/ml.
北京杰辉生物提供免费检测服务:使用我公司试剂盒,只收取试剂盒的费用,检测费用全免。我们将根据实验工作量和难易程度,双方协定实验周期,保质保量完成委托实验。
人诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA试剂盒操作步骤
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔、样本孔和空白孔,空白孔什么都不加;标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;
4. 随后标准品孔和样本孔中(空白孔不加)加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体50μL,,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 所有孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 所有孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
人诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA试剂盒结果判断
绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。