本试剂盒仅供研究使用。 96T使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中单纯疱疹病毒Ⅱ型抗体(HSVⅡ-Ab)表达。实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人单纯疱疹病毒Ⅱ型抗体(HSVⅡ-Ab)表达。用纯化的人单纯疱疹病毒Ⅱ型抗原包被微孔板，制成固相抗原，可与『样品中单纯疱疹病毒Ⅱ型抗体相结合，经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与HRP标记的单纯疱疹病毒Ⅱ型抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物〓，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定≡吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中人单纯疱疹病毒Ⅱ型抗体(HSVⅡ-Ab)的存在与〓否。试剂盒组成 1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 阳性对照 0.5ml×1瓶3 酶标包被板 12孔×8条 9 阴性对照 0.5ml×1瓶4 样∑　品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份5 显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张 6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个标本←要求 1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将●标本放于-20℃保存，但应避免反≡复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1. 编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同〒）2. 加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔ξ　底部，尽量不触及孔壁，轻轻№晃动混匀，3. 温育：用封板膜封板后置卐37℃温育30分钟。 4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤╳液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 7. 温育：操作同3。8. 洗涤：操作同5。9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震↘荡混匀，37℃避光显色15分钟.10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立♀转黄色）。11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。