【产品名称】
通用名称:人成纤维细胞生长因子23检□ 测试剂盒㊣(酶联免疫法)
【包装规格】
96人份/盒
【预期用途】
本产品仅供科研使用,主要用于检测人成纤维细胞生长因子23在血清、血浆或细胞培养基中的水平。
【简介】
成纤维细胞生长因子23(FGF-23)是最近发现的相关蛋白大家族中的新成员。其基因编码为一个250个氨基酸的蛋白。FGF-23(氨基酸 1-24)的氨基酸-末端蛋白是疏水的且很可能用作是允许分泌进入血液循环的信号肽。它的羧基-末端蛋白(氨基酸 180-251)与其它FGF蛋白家族成员仅有限制的相同氨基酸。FGF-23是与FGF-21 (~24% 的氨基酸次疗要相同)和FGF-19 (~22%的氨基〒酸次序相同) 最接近。
肾脏的磷酸盐流失障碍导致血磷酸盐过少是骨骼矿化和生长板发展缺陷因素之一。有常染色体遗传的低磷血症(ADHR)的病人,罕见的遗传基因混乱,携带制造一种不同变化转变的FGF-23 的蛋白质的抵抗蛋白水解的裂开。此外,肿瘤能引起瘤原性的骨软化(OOM)已经显示过量表达的FGF-23 mRNA产生与其相同的效果并且血中异常浓度的FGF-23能导致肾脏的磷↘酸盐流失障碍。一致的结论,在啮齿动物中应用重∏组的FGF-23显示增加尿中磷的排泄量因此导致血磷酸盐过少和骨软化/佝偻病。总计,所有现在的数据建议FGF-23直接或间接与磷酸盐动态平稳规则有关。
测量人FGF-23在血液中循环可能提供重要的诊断工具用●于实验室评估各种各样不同的血磷酸盐流失障碍,包括瘤原性的骨软化,X-链锁低磷血症性佝偻病和常染色体遗传血磷酸盐过少佝偻病。此外,灵敏地检测FGF-23可能提供对骨骼和矿物动态平衡规则的新的见识。
【检验原理】
人FGF-23 (C-端) ELISA 试剂盒是双位点酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清、血浆或细胞培养中FGF-23。两个亲合纯化的山羊多克隆抗体经过挑选检测FGF-23的羟基-末端(C-端)的抗原决定部位。一个抗体是固定在微量孔中包被。另一个抗体是生物素与辣根过氧化物酶(HRP)与抗生物素蛋白共扼结合检测。
包含FGF-23的样本与固相捕获抗体和生物素抗体同时在微量孔中孵育。样本中包含的FGF-23与捕获抗体和检测抗体免疫结合形成“夹心抗体”复合物:
微量孔/抗人类FGF—人类FGF-23—生物素/抗人类FGF
( C-端) (C-端)
在这个孵育期末,清洗微量孔去Ψ 除任何未结合抗体和其它物质。固定的夹心抗体复合物与HRP-抗生素同步孵育允许酶结合到生物素抗体。在孵育的末期再次清洗微量孔移出未结合的物质。微量⊙孔中的酶结合物与底物溶液同时孵育反应并且用分光光度微量板读数仪检测。抗体复合物结合到微量板中的活性与样本中的FGF-23数量成正比。标准曲线由绘制吸光度VS每个FGF-23标准品的浓度形成线性或对数曲线。样本中人类FGF-23的浓度直接从曲线中查找。
【储存条件及有效期】
收到试剂后试剂盒贮存在2-8ºC:标准和质控在复溶后贮存在-20ºC或更低的温度下。 试剂盒的有效期参照试剂盒的标签。所有成份都同样稳定至有效期。所有试剂准备使用之前先放置在室温并且温柔地旋涡和倒置混匀。不同批号的试剂不能组合或交换使用。
【适用仪器】
适用于具有450nm、650nm波长的所有全自动、半自动酶标仪。
【样本要求】
测量FGF-23浓度使用血清、EDTA血浆或细胞培养基。需要提供双倍检测300微升的血清、血浆或培养基样本。
推荐早晨12小时空腹血清样本。允许放置室温下凝ω固血液以得到血清。离心样本和分离血清、血浆或培养基细胞。样本应马上分析或冰冻保存在-20ºC或更低的温度。避免反复冻ω 融样本。
【参考文献】
1. White KE, Evans WE, O´Riordan JLH, Speer MC, Econs MJ, Group 2. Lorenz-Depiereux B, Grabowski M, Mettinger T, Strom TM. “Autosomal dominant hypophosphataemic rickets is associated with mutations in FGF23”. Nat. Genet, 2000, 26:345-8.
2. Yamashita T, Yoshioka M, Itoh N. “Identification of a Novel Fibroblast Growth Factor, FGF-23, Preferentially Expressed in the Ventrolateral Thalamic Nucleus of the Brain.” Biochemical and Biophysical Research Communications, 2000, 277:494-98.
3. White KE, Jonsson KB, Carn G, Hampson G, Spector TD, Mannstadt M, Lorenz-Depiereux B, Miyauchi A, Yang IM, Ljunggren O, Mettinger T, Strom TM, Jueppner H, Econs MJ. “The Autosomal Dominant Hypophosphatemic Rickets (ADHR) Gene Is a Secreted Polypeptide Overexpressed by Tumors that Cause Phosphate Wasting”. J. Clin. Endocrinol. Metab., 2001, 86:497-500.
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5. Strewler G. “FGF23, Hypophosphatemia, and Rickets: Has Phosphatonin Been Found?”. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2001, 98:5945-46.
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