制备单克隆抗体（4-6个月）

 

在实验过程中为尽量减少被传染性病菌感染的△危险，同时又要尽可能增强抗原的免ξ　疫反应，我们采用无特殊病原体小鼠(SPF mouse);同时为了达到最佳的免疫效果，在融合前，免疫动物需要较长的时间，因此杂交瘤细胞株的制备需要4-6个月的时间。为降低顾客方实验风险，我们分二个阶段制备杂交瘤细胞株，顾客方需分步付①费：

第一阶段：免疫小鼠
● 设计实验方案；
● 实验动物：5只6-8周龄BALB/C小鼠；
● 顾客方需提供抗原样品>7mg,纯度>90%.抗原经SDS-page检测。若达不到要求的抗原顾客仍坚持启动项目，风险由顾客承担；
● 每只BALB/C小鼠至少免疫数次，每次免疫后均╱用ELISA测定抗体效价；
● 验收方式：通过ELISA方法进〒行检验；
● 验收标准：免疫后的小鼠血清与客户方提供的抗原样品有→特异性结合，抗血清效价在1：10,000 以上
● 顾∑　客方认可后，杂交瘤细胞珠进入第二阶段制备，否则合作终止。

第二阶段：分泌抗体的杂交瘤株的建立
● 免疫细胞与骨髓瘤细胞融合，通过选择和筛选以及克隆化，最终提供2-3个克隆的杂∏交瘤，以及相应的杂交瘤克隆培养物上清液或少♀量腹水，并附杂交瘤克隆建株过程◣的总结报告（包括融合、克隆过程，抗体效价以及抗体免疫球蛋白克隆的亚型）。
● 验收方式：通过ELISA方法进↓行检验；
● 验收标准：提供的杂ぷ交瘤培养物的腹水（或上清液）与顾客方提供的抗原样品有特异性结合，同时抗体特异性只针对客户方提【供的抗原№样品做出保证；

最终提供：2-3株杂交瘤细胞株和少量腹水（或上清液），并给出相应的鉴定报◤告（包括单抗的亚型）