代做MTT实验技术服务(含mtt实验步骤,mtt实验方法)
MTT方法简介:
四甲基偶氮唑盐比色法(MTT方法),是通过快速简便的颜色反应来检测细胞存活数量。其原理是MTT可作为哺乳类动物细胞线粒体中琥珀酸脱■氢酶的底物。当有活细胞存在时,线粒体内琥珀酸脱氢酶可将淡黄色的MTT还原成蓝紫色的针状甲月替(Formazan)结晶并沉积在细胞中,结晶物能被二甲基亚砜 (DMSO)溶解,用↘酶联免疫检测仪在570nm波长处测定其☆吸光度OD值,OD值的高低可间接反映活细胞的数量及其活性。
目前MTT法常用于以下几◆个方面的研究:
1、检测细①胞活性:常作为细胞毒性试验的一种方法。
2、体外药物敏感实验:该方♀法简便、经济、快速,重复性好,所需的细胞数较少,没『有放射性,目前广泛的用于临床前的抗∞癌药物的筛选研究。
3、一些细胞因子活性的∑ 研究
主要实验步骤如【下:
1)将对数生长期细胞用胰酶消♀化后配制成浓度为1-10×104个/ml的细胞」悬液,按1000-10000个细胞/孔接种于96孔板,每孔加100μl。
2)将平板置
3)用快ω速翻板法倒掉培养液,每孔加入用无血清1640按5mg/ml新鲜配制的ぷMTT溶液100μl,温育4小时,使MTT还原为甲 月替,再次倒掉上①清液,每孔加DMSO(二□ 甲基亚枫)200μl,用平板摇床摇匀后,使用酶标仪测定光密度值(OD)(参考波长450nm,检测波长570nm),以溶剂对照处理细胞为对照组,按下述公式计算化合物◤对细胞的抑制率,并按中效方№程计算半数抑制浓度IC50:
客户方需提供:
样本描述,相关的实验设计内容如作用时间和样本浓度等。
公司『方提供※:
实验结果IC50值。
实验周期与费用:
实验费用以样本数和细胞株的种∑ 类数目为单位计算▓,实验周期为21个工作日,公司将在材料和预付的实验经费全部到位的工作日▼后30个工作日之内提交实验结果。
上海卓康生物科技有限公司