我们提供的载体构建技术服①务包括:DNA片段的克隆,包括基因调控元※件、SiRNA基因干【扰片段、miRNA基因表达、基因表达、基因打靶等质粒载体的构建;表达系统包括E.coli、昆虫及哺乳细胞】表达系统。
1. 基因过「表达载体构建
伟通生物提供以PCR为基础的各类载体构建,如细菌表达载体、酵母表达载体、动物表达载体,报告基因载体,信号通道载体等。依托我们丰富的载体库资源,以及强大的载体设计能力,我们每年至少完成过∞千例构建载体的实验。
由 客户提供基因ID或者基因序列,为客户从cDNA或者☆基因组DNA中钓』取目的基因,并克隆至指定载体上。由于材料的个体差异及PCR过程※中会产生突变等原 因,我们不保证获取的基因与参考●序列的碱基完全一致。在基因的亚克隆服↘务中,我们可以将目的基因或某功能元件片段亚克隆转移至客户载体或∏者伟通提供的表 达载体上。
2. RNA干扰
1) shRNA表达载体构建
伟通生物采用U6或H1启动子的shRNA表达载体,可以在细胞内直接转录出shRNA,行使其RNAi功能,GFP可以监测★其转染效率,抗性基因可以用于药物压力下稳定细胞株△的筛选,能够解决化学合成siRNA干扰时间短的缺点。同时〓提供用于RNA干扰实验的腺病毒载体 (Adenoviral vector)、腺ζ 相关病毒(AAV Vector)和慢病毒载体▅(Lentiviral vector)病毒型载体构建服务。我们根据客户提供的基因ID设计3到4个shRNA靶点并合成引物,构建到RNAi表达载体,测序验证正◇确的shRNA干扰载体,进行高纯度质粒抽提,shRNA干扰载体后续可以直接进行细胞转染实验,病毒包装实验和稳定细▓胞株筛选实验等。
2) microRNA表达载体构建
伟通生物采用CMV启动子miRNA表达载体,可以在细胞内直接转录出miRNA,行使※其功能,提供pri-miRNA表达载体(pri-miRNA expression vector)、pre-miRNA表达载体(pre-miRNA expression vector)构建服务;同时还提供腺病毒载体 (Adenoviral vector)、腺相关病毒载体(AAV vector)和慢病毒载体(Lentiviral vector)病毒型载体miRNA构建服务, miRNA表达载体后续可以直接进行细胞转染实验,病毒╳包装实验和稳定细胞株筛选实验等。
3. 质粒提取服务①
对客户提供的质粒进行转化,挑选长势良好的克隆接种进行高纯度质粒抽提。抽提的质粒能够满足分子克隆、细胞转染等实验要求。
客户须知:
1、调取基因所需的原材料如由客户提供,客户应保证所提供原材料即基因模板的正确性。如基因模板本身具有移码突变或其它无︾义碱基突变,由此造成的实验时间延误、重复实验费用或其它经济损失均由客户承担。(从客户提供的基因@模板调取基因,如重¤复两次,均在相同位置出现相同突变,则认为是模板问题。)
2、如目的基因所在的载体由客户◤提供,则客户需要提供足量高纯度的质粒(>5ug,电泳图清晰,达酶切测序要求)及本公司鉴定工作所需的ω材料。
3、本公司在收到客户提供的材料后会在第二个工作日起开始鉴定工作,鉴定的时间不包№括在实验周期内。
4、客户应对所提供的材料及信息负责,如因客户提供的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失由客户承担。
服务承诺:
1、调取的→基因或功能元件片段无移码突变(原材料由客户提供的不在此例),无义碱基突变控制在1%以内。
2、完整的实验报告、测序报告。
服务名称 |
货期(工作日) |
产品规格 |
报价 |
载体构建 |
|||
质粒大规模提取服务(无内毒素要求) |
10 |
200ug |
500 |
载体构建,基因大小<1.5kb |
10 |
10ug |
1000 |
载体构建,基因大小1.5kb~2kb |
10 |
10ug |
1200 |
载体构建,基因大小2kb~2.5kb |
10 |
10ug |
1500 |
载体构建,基因大小2.5kb~3kb |
10 |
10ug |
2000 |