本试剂盒仅供研究使用说明书由广州凯升生Ψ物科技提供

通用名：人组☆织多肽抗原（TPA）酶联免疫诊断试剂盒

使用目的：

本试剂盒用于测定人血清、血浆、或其它相关组织液中组织多肽抗原（TPA））含量。

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中组↘织多肽抗原（TPA）水平。用纯化的人【抗-组织多肽抗原包被ω　微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入组织多肽抗原（TPA），再与HRP标记的羊抗人抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用①下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人组织多肽〓抗原（TPA）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲↑线计算样品中人组织多肽抗原（TPA）浓度。

1．标本采集后尽早▲进行实验。

2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的」（HRP）活性。

3．可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

1.         标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标准∑　品100μl，然后在︾第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到△第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标¤准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加①标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别ξ　取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别□　加标准品稀释液50μl，混匀后从■第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为120
U/L，80 U/L ，40 U/L，20 U/L，10 U/L。

2.         加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相∩同）、待测样品◆孔。在酶标包被板上待测ω样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔①底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混□　匀。

3.         温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。  

4.         配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用

5.         洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.         加酶：每孔加入酶标试→剂50μl，空白孔除外。

7.         温育：操作同3。

8.         洗涤：操作同5。

9.         显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震⌒　荡混匀，37℃避光显色15分钟.

10.     终止：每孔→加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11.     测定：以空白空调★零，450nm波长依序测量各】孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进卐行。

  以标准物的浓度为横坐标（对数坐标），OD值为纵坐标（普通坐标），在坐※标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘█以稀释倍数；或用〗标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回↙归方程式，将样品的OD值∑　代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板『开封后如未用完，板条应装入密封袋」中保存。

2．浓洗涤液可能会有结▼晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验ㄨ误差。一次︽加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大ω于标准品孔OD值的1.5倍），请先用样品稀◣释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请◥避光保存。

7．严ぷ格按说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异，以英文说明☉书为准。

10 U/L -150 U/L

96人份/盒

1．试◣剂盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6个月