分子生物学技术服务
我们的分子生物学技术平台主要包括基因调控元件的克隆，基因修饰，基因报告系统、基因表达系统和转基因载体的构建。

基于分子生物学技术平台，我们提供的技术服务包括DNA.片段的克隆，包括基因调控元件、SiRNA基因干扰片段、miRNA基因表达、基因表达、基因打靶等质粒载体的构建；表达系统包括E.coli、昆虫及哺乳细胞表达系统。

1. RNA干扰

1) RNAi表达质粒构建

拜沃生物科技有々限公司采用U6或H1启动子的shRNA表达载体，可以在细胞内直接转录出shRNA，行使其RNAi功能，GFP可以监测其转染效率，抗性基因可以用于药物压力下稳定细胞株的筛ζ　选，能够解■决化学合成siRNA干扰时间短的缺点。同时提供用于RNA干扰实□验的腺病毒载体 (Adenoviral vector)、腺相关病毒（AAV Vector)和慢病毒载体(Lentiviral vector)病毒型载体构建服①务。我们根据客户提供的基□　因ID设计3到4个shRNA靶点并合成引物，构建到RNAi表达载体，测序验证正确的shRNA干扰载体，进行高纯度质粒→抽提，shRNA干扰载体后续可以直接进行细胞转染实验，病毒包装实验和稳定细胞株筛选实验等。


2. 基因克隆↓与亚克隆

由客户提▲供基因ID或者基因序列，为客户从cDNA或者基因组DNA中钓『取目的基因，并克隆至指定载体上。由于材料的个体差异及PCR过⌒　程中会产生突变等原因，我们不保证获取的基因与参考序列的碱基完全一致。在基因的亚克隆服务中，我们可以将目的基因或某功▼能元件片段亚克隆转移○至客户载体或者拜沃生物提供的表达载体上。

3. 定点突变ㄨ服务

在很多︾情况下，您获得的基因序列可能并不是您需要的最终序列，或许在某些地方有部分碱基不符合您的实◥验要求。比如有部分多余的碱基，或者丢失了部分碱基，或ぷ者个别碱基有突变，这些我们姑且都认为它是基因突变。那么要得到最终符合要求的序列，便需要对其进行修改。我们总称为基因突变技术服务∩。

4. 质粒提取ㄨ服务

对客户提供的质粒进行转化，挑选长势良好的克隆接种进行高纯度质粒抽提。抽提的质粒能够满足分子克隆、细胞转染等实验要求。

5. Western Blot

Western免疫印迹（Western Blot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用→抗体进行检测。经过PAGE分离的蛋白质样品，转移︻到固相载体（例如PVDF膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋↑白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载△体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反々应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以●检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术广泛应用于检测蛋白水平的表达。

客户须知：

1) 调取基因所需的原材料如由客户提供，客户应保⊙证所提供原材料即基因模板的正确＠性。如基因模板本身具有移码突变或其它无义碱基突变，由此造成的实◥验时间延误、重复实验费用或其它经济损失均由客户承担。（从客户提供的基因模板调取基因，如重复两】次，均在相◥同位置出现相同突变，则认◣为是模板问题。）

2) 如目的基因所在的载体由客户提供，则客户需要提供足量高纯度的质粒（>5ug，电泳图清↓晰，达酶切测序要求）及本公司鉴定工作所需㊣的材料。

3) 本公司在收到客户提供的材》料后会在第二个工作日』起开始鉴定工作，鉴定的时间不包括在实验周期内。

4) 客户应对所提供的材料及◢信息负责，如因客户提供⌒　的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失由客户承担。

服务承诺：

1) 调取的基因或╳功能元件片段无移码突变（原材料由客户提供的不在此例），无义碱基突变控制在1%以内。

2) 完整的实验报告、测序报告。