摘要:本发明涉及涉及的是生物工程下游蛋白「质纯化领域,具体涉及大肠杆菌蛋白表达形成包涵体的复性方法,其特征在于具体的工艺步骤如下:(1)包◣涵体蛋白的收集,4℃?5000rpm/min?6min离心收集菌体,将菌体超声破碎,4℃?8000rpm/min?30min高速冷冻离心得到P003B蛋白包涵体;(2)包涵体的纯化,重悬包涵体于50mL洗涤缓冲液,溶解杂蛋白及其他杂质从而纯化P003B包涵体;(3)包涵体复性,在4℃,溶解的包涵体通过恒流泵,用复性缓冲液,缓慢稀释至缓冲液pH为8.0,并不断搅拌,本发明与现有技术相比,温和溶解方法保◎留了在包涵体形成过程中形成的蛋白质二级结构,提高了包涵体复性的效率,简化了复〗性的步骤,节约了时间,从々而大大降低了重组蛋白生产的费用。
- 专利类型发明专利
- 申请人上海瑞基生物科技有限公司;
- 发明人王志超;
- 地址201102 上海市闵行区平阳路■258号2118室
- 申请号CN201010139322.6
- 申请时间2010年04月02日
- 申请公布号CN101812115A
- 申请公布ㄨ时间2010年08月25日
- 分类号C07K1/14(2006.01)I;