分光光度计，又称光谱仪(spectrometer)，是将成分复杂的光，分解为光谱线的科学』仪器。测量范围般包括波长范围为380~780 nm的可见光区和波长范围为200~380 nm的◢紫外光区。不同的光源都有其有的ζ发射光谱,因此可采ㄨ用不同的发光体作为仪器的光源。钨灯的发射光谱:钨灯光源所发出的380~780nm波长的光谱光通过三棱镜折射后，可得到由红、橙、黄、绿、蓝、靛、紫组成的⌒ 连续色谱;该色谱可作为可见光分光光度计的光源
光度定义
分光光度法是在定波长处或定波长范围内光的吸收度，对该物质行定性或定量分析。常〗用的波长范围为:(1)200~380nm的紫外光区，(2)380~780nm的可见光区，(3)2.5~25μm(按波数ζ 计为4000cm<-1>~400cm<-1>)的红外光¤区。所用仪器为紫外分光光度计、可见光分光光度计(或比色计)、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。为保证测量的精密度和准确度，所有仪器应按照家计量检定规程或本附■录规定，定』期行校正检定
仪器组成
分光光度计已卐经成为现代分子生物实验室常规仪器。常ξ用于核酸，蛋白定量以及细菌生长浓度的定¤量。
仪器主○要由光源、单色器、样品室、检测器、信号处理器和显々示与存储系统组成。
原理
分光光度计采用个可以产生多个波长的光源，通过系列分光装置，从而产生定波长的光源，光线透过测试的样品后，部分光线被▂吸收，计算样品的吸光值，从而转化成样品♂的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。
单︽色光辐射穿过被测物质溶液时，被该◥物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚ζ 度(光路长度)成正比，其关系如下式:
A=-lg(I/I。)=-lgT=kLc
式中 :A 为吸光度;
I。为入射的单色光强度;
I 为透射的单色光强度;
T 为物质的透射率;
k 为摩尔吸收系数;
L 为被分析物质的光程，即比色皿的「边长;
仪器点
的双光路、双光束光学系统，仪器分∩辨率更⊙，杂散光更Ψ低，稳定性、可靠性更强「，分¤析更加准确
采用320*240位□点阵式亮6 "液晶显示器，显示清晰，信息备
的长光程光路设计，使仪器分辨率更，尤其适合微量测试 强大的数据处理功能，使测试结果能得到充分的应用◥，用户编辑↘更为简单快捷
采用悬架式光学系统设计，整体光路立固▆定在16mm厚的铝制无变形ㄨ基座上，底板的变形和外界的震动对光学系统不产▓生任何影响，从而大大提了仪器的稳定性和可靠性
采用同步正弦机构，波长准确度，重复性好
采用ARM系统
0.1/0.2/0.5/1.0/2.0/4.0六档光谱带宽自动可选,满足不同用户的测量需求
24位速、精度A/D转换，仪器精度更、反应╲速度更快
主要元件采用】口配置，使仪器杂散光更低、稳定性、可靠性更强
功能更加强大，主机可立①成光度测量、定量测量、光谱扫描、动力学、DNA/蛋白质测№试，多波长测试及数据打印等功能
操作方法
1.接通电源，打开仪器开关，掀开样品室暗箱盖，预热10分钟。
2.将灵敏度开关调至"1"档(若零点调节器︻调不到"0"时，需选用较档←。)
3.根据所需波长转动＠ 波长选择钮。
4.将空白液及№测定液分别倒入比色杯3/4处，用擦镜纸擦清外壁，放入↓样品室内，使空白管对准光路▅。
5.在暗箱盖开启状态下调∏节零点调节器，使读数盘指针指向t=0处。
6.盖上暗箱盖，调节"100"调节器，使空白管的t=100，指针稳定后逐步拉出样品滑竿，分别读出测定管的光密度值，并记录。
7.比色毕，关上电源，取出比色皿洗卐净，样品室用软布或软纸擦净。
注意事项
1.该仪器应放在干燥的房间〗内，使用时放置在坚固平╲稳的工作台上，室内照▽明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风※，防止灯泡』灯丝发亮不稳定。
2.使用本仪器前，使用者应该了解本仪器的结构和工作原理，以及各个操纵旋钮之功能。在未按通电源之前，应该对仪器的安全性能行检查，电源●接线应牢固，通电也要∞良好，各个调节旋钮的起始位置应该正确，然后再按通电源开︾关。
3.在仪器尚未接通电源⌒ 时，电表指针ω 必须于"0"刻线上，若不是这种情况，则可以用电表上的校正螺丝行调节。
日常维护
分析仪器工作者要懂得仪器的日常维护和对主要技术指标的简易测试方法，自己经常对仪器行维护和测试，以保证仪器工作在佳状态。
、温度和湿度是影响仪器性能的重要因素。他们可以引起机卐械部件的锈蚀，使金属镜面的■光洁度下降，引起仪器』机械部分的误差或性能下降;成光学部件如光△栅、反射镜、聚焦镜等的铝々膜锈蚀，产生光能不足、杂散光、噪声等，甚至仪器停止工▽作，从而影响仪器寿命。维护保养时应定期加以校正。应具备四季恒湿的仪器室，配置恒温设备，别是地处南方地区的实♀验室。
二、环境中的尘埃和腐蚀性气体亦※可以影响机械系统的灵活性、降低各种限位开关、按键、光电偶合器的可靠性，也是成必须学部件≡铝膜锈蚀的原因之。因此︾必须定期清洁，保障环境和仪器室内卫生条件，防尘。
三、仪器使用定周期后，内部会积累定量的尘埃，好由维修工程师或在工程师指导下定期开启仪器外罩对内部行除尘工作，同时将各发热元件的散热器重新紧固，对光⊙学盒的密封窗口行清洁，必要时对光路行校◥准，对机械♂部分行清洁和必要的润滑，后，恢复原状，再行些必要的检测、调校与记录。
折叠编□辑本段维护保养
分光光◥度计作为种精密仪器，在运行工作过程中由于工作环境，操作方法等种种原因，其技术状况必然会发生某些变化，可能影响设备的性能，甚至诱发设备↘故障及事故。因此，分析工作者必须了解分光光度计的基本原理和㊣ 使用说明，并能及时发现和排除这些隐患，对已产生的故障及时维修才能①保证仪器▂设备的正常运行。
1)若大幅度改变测试◤波长，需稍等片刻，等灯热平衡后，重新校正"0"和"100%"点。然后再测量。
2)指针式仪器在未接通电源时，电表的指针必须位于零刻度上。若不是这种情况，需行机械调零。
3)比色皿使用【毕后，请立即用蒸馏水冲洗】干净，并用干净柔软的△纱布将水迹擦去，以防◥止表面光洁度被破坏，影响比色皿的透光率。
4)操作人员不应轻易动灯泡及反光镜灯，以免影响光效∩率。
5)1900型等分光光度计，由于其光电接收装置为光电倍增管，它本身的点是放大倍数大，因而可以用于检测微弱光电信号，而不←能用来检测强光。否则〓容易产生信号漂移，灵敏度下≡降。针对其↓上述点，在维修、使用此类仪器时应注意不＠ 让光电倍增管长时间暴露于光下，因此№在预热时，应打开比色皿盖或使用挡光杆，避免长时间照射使其性能漂移而导致工作不稳。
6)放大器灵敏度换挡后，必须重新调零
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